摘要
核受体是药物开发的重要靶点，孤儿核受体Nur77是调控炎症反应的一个关键蛋白，Nur77缺失与炎症性疾病的发生发展密切相关，因而，Nur77是开发治疗炎症性疾病药物的一个重要靶点。雷公藤作为一种具有消炎清毒作用的传统中药材，在类风湿性关节炎和皮肌炎等炎症疾病上有很好的疗效。雷公藤红素是其发挥抗炎作用的最主要因素之一。我们课题组前期发现核受体Nur77是雷公藤红素发挥抗炎活性的直接靶点。本课题的研究目的就是筛选发现特异性靶向核受体Nur77并具有抗炎活性的雷公藤红素衍生物，并以此化合物为探针研究雷公藤红素通过诱导线粒体自噬减轻炎症反应的作用机制。 我们通过筛选雷公藤红素的衍生物，发现XS0557可以直接靶向Nur77，表现出具有依赖于Nur77的抗炎活性。与雷公藤红素相比，XS0557的毒副作用显著减小，对正常细胞毒基本无毒，表明XS0557是一个具有潜力的抗炎小分子。 我们进一步以XS0557为小分子探针研究线粒体自噬抗炎的作用机制。经典的线粒体自噬途径是由PINK1-Parkin所介导，即受损的线粒体会锚定激酶PINK1，进而磷酸化并招募E3泛素连接酶Parkin，磷酸化的Parkin进一步泛素化自噬受体，介导线粒体自噬。我们前期发现，在TNFα等炎症因子刺激下，Nur77发生磷酸化，在雷公藤红素存在的情况下，磷酸化的Nur77出核并定位到线粒体上，继而与TRAF2及p62相互作用，诱导线粒体自噬。但诱导Nur77磷酸化的激酶还不清楚。TBK1是一种调节炎症自噬的激酶，我们的实验结果表明TBK1可以磷酸化Nur77，TBK1抑制剂可以抑制Nur77磷酸化修饰及其与p62的相互作用和共定位，相继的实验结果显示TBK1抑制剂还可以抑制XS0557诱导的线粒体自噬以及抗炎作用。这些结果表明TBK1很有可能是磷酸化Nur77并参与调控Nur77线粒体自噬通路的激酶。 综上，我们发现了新型靶向Nur77并具有抗炎作用的雷公藤红素衍生物XS0557，同时还发现了TBK1可以磷酸化Nur77并激活Nur77依赖的线粒体自噬通路，加深了我们对雷公藤红素通过靶向Nur77诱导线粒体自噬通路的认识。
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