摘要
研究背景和目的: 结直肠癌的发生率和死亡率在全球常见的肿瘤中排名常年靠前，根据我国癌症中心2022年数据统计显示，结直肠癌(CRC)发生率高居第二位，并且死亡率高居第四位，根据历年来的数据显示结直肠癌一直处于进展阶段，是世界范围内的难题[1]，并且数据显示大多数结直肠癌患者在发现该病灶时便被已经处于癌症的中晚期，因此如何有效地遏制结直肠癌的进展和转移，具有十分重要的临床意义。LIM和SH3蛋白1(LIMandSH3protein，LASP-1)是本课题组前期研究筛选、鉴定及探索的结直肠癌转移相关蛋白，其在结直肠癌的发生发展以及转移中均发挥着重要作用。我们课题组前期对其在肿瘤中的作用已经进行了相对深入的探索，而其与肿瘤免疫微环境的相互调控关系还有待我们进一步探究。在本研究中，通过一系列分子生物学以及分子病理方法，结合患者组织标本及体内外生物学方法研究，对LASP1与免疫微环境二者调控网络进行初步探索及验证，根据相关的实验数据及理论支撑为LASP1促进结直肠癌进展和转移，明确LASP1在结直肠癌中的重要作用提供了更加充分可靠的科学依据。 研究方法: 1、应用免疫组织化学技术（immunohistochemistry，IHC）分析结直肠癌临床样本中LASP1与肿瘤免疫细胞浸润的相关性; 2、炎症因子蛋白芯片检测过表达LASP1后结直肠癌上清中分泌型细胞因子的变化;KEGG及GO富集分析相关通路的变化; 3、构建结直肠癌细胞与巨噬细胞样细胞共培养体系;使用Transwell小室培养方法检测单核细胞诱导来源的巨噬细胞对RKO细胞迁移、侵袭能力的影响;利用电镜技术检测LASP1对巨噬细胞极化的调控; 4、构建小鼠盲肠原位移植瘤模型，体内探索LASP1对结直肠癌生长及免疫细胞浸润数量的影响。 研究结果: 1、人结直肠癌组织样本中LASP1的表达与M2型巨噬细胞的数量呈正相关，差异具有统计学意义; 2、LASP1过表达促进RKO细胞分泌M2型巨噬细胞相关炎症因子IL4，KEGG分析提示IL14受体相关信号通路显著富集;结直肠癌细胞过表达LASP1可以诱导巨噬细胞向M2型极化; 3、巨噬细胞样U937和THP-1细胞可以促进结直肠肿瘤细胞的迁移、侵袭能力; 4、体内LASP1过表达促进结直肠癌肿瘤生长，转移并增加免疫细胞的浸润。 结论: 本实验研究结果证实，结直肠癌细胞中LASP1过表达可以促进肿瘤细胞分泌巨噬细胞相关炎症因子IL4，通过IL4受体相关信号通路诱导肿瘤相关巨噬细胞向M2型极化，M2型巨噬细胞进一步促进了结直肠癌细胞的侵袭和转移能力，促进肿瘤进展。
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