摘要
研究背景与目的: 非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkinlymphoma，NHL)是常见的血液恶性肿瘤。根据修订的世界卫生组织分类，它被分为大约70个组织学亚型。其中弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuselargeB-celllymphoma，DLBCL)是最常见的亚型，其临床特征侵袭性强。约有50％～60％的患者通过环磷酰胺、阿霉素、长春新碱和强的松龙联合利妥昔单抗治愈。然而，复发、难治的DLBCL，常规化疗就很难收到良好的疗效。自体干细胞移植后进展的DLBCL患者，平均总生存期(overallsurvival，OS)少于10个月。因此，能够改善复发、难治DLBCL患者预后与疗效的新方法迫切需要。 嵌合抗原受体(chimericantigenreceptor，CAR)T细胞是某些特定恶性肿瘤的有效治疗方法。CD19是DLBCL细胞上高表达的一种抗原，因此，抗CD19CAR-T细胞为复发、难治的DLBCL患者提供了希望。 尽管CD19CAR-T细胞在血液病中的临床试验结果可观，但是危及生命的不良事件影响了临床的广泛应用，包括细胞因子释放综合症(cytokinereleasesyndrome，CRS)和神经毒性(neurotoxicity，NT)，这些严重的并发症都可能导致细胞治疗的失败。 我们采用低剂量的二代含有scFvCD19/4-1BB/CD3ζ结构的CD19CAR-T细胞治疗≥2线系统化疗后复发、难治的DLBCL，评估治疗的有效性与安全性。目前，CAR-T细胞的疗效仍然无法预测，因此我们设想，CAR-T细胞的体外杀伤试验，及检测CAR-T细胞亚群是否可以预测细胞治疗的疗效？探讨IL-6、CRP与发热是否可以预测CRS。 研究方法: 入组患者年龄≥2且≤70岁，预期生存期大于3个月;经免疫表型分析CD19阳性;ECOG评分≤2分（附录1）;复发、难治的DLBCL患者。患者单采外周血单个核细胞，磁珠分选CD3+的单个核细胞，进行CD19CAR-T细胞制备，培养成熟的CAR-T细胞流式检测细胞亚群，同时进行K562CD19-/RajiCD19+靶细胞培养及杀伤毒性检测，二代CD19CAR-T细胞回输前，患者进行不完全清髓处理，间隔24-48小时后回输细胞。回输后流式检测血中细胞因子的变化情况。观察不良反应，影像学评价疗效，统计分析结果。 研究结果: 有效性评价:-12例≥2线系统化疗后复发、难治的DLBCL患者参加CD19CAR-T细胞的临床试验，总体缓解率(overallresponserate，ORR)66％(8/12);CR率41％(5/12)，部分缓解(partialresponse，PR)率为25％(3/12)，稳定(stabledisease，SD)率为25％(3/12)，进展(progressivedisease，PD)率为8％(1/12)。 安全性评价:CRS不良反应共75％(9/12)，均为1-2级，没有3-4级不良反应。没有NT和死亡患者。 实验室结果:1.CAR-T细胞的体外杀伤试验和CAR-T细胞亚群无法预测细胞治疗的疗效。2.IL-6与发热可更好地预测CRS。 结论:低剂量的CAR-T细胞治疗复发难治的DLBCL安全性高，没有3-4级CRS。没有NT和死亡患者，并且疗效不减。CAR-T细胞的体外杀伤试验和CAR-T细胞亚群无法预测细胞治疗的疗效。IL-6与发热可预测CRS。
NETL