摘要
目的：随着对肿瘤微环境研究的不断深入，对肿瘤微环境（TME）的复杂成分及各成分间的相互作用有所了解，靶向肿瘤微环境成为了肿瘤治疗的新兴疗法。一些研究表明中药具有提高机体免疫力和抗肿瘤作用，因此，本研究借助系统药理学方法探讨三黄联用（黄连、黄芩、黄柏）对于非小细胞肺癌免疫相关机制研究，并对其活性成分在体内、体外抗肿瘤疗效进行综合评价。 方法：首先，利用中药系统药理学数据库（TCMSP）构建三黄活性成分数据库，并通过OB、DL、HL三个药代动力学参数筛选活性化合物；然后利用WES和SysDT方法预测活性成分的潜在靶点，并对靶点进行GOBP/KEGG富集分析；并构建网络图；接着选取三黄的主要活性成分小檗碱、黄芩苷、黄柏碱（BBP）进行体内外抗肿瘤研究，首先通过CCK-8与免疫印迹验证BBP的体外抗肿瘤作用；接着通过荷瘤小鼠药效学实验确定BBP的体内抗肿瘤效果，并通过流式细胞术对肿瘤组织中浸润的CD8+T细胞进行含量检测；最后，通过荷瘤小鼠模型研究BBP与anti-PD-L1抗体联用抗肿瘤疗效，以探究BBP在免疫治疗中的作用。 结果：首先通过系统药理学方法对三黄进行剖析，筛选得到56个活性成分，338个对应靶点；接着通过GOBP与KEGG富集分析发现三黄与非小细胞肺癌、anti-PD-L1单抗有关联性，表明三黄可能通过参加肿瘤免疫反应发挥抗肿瘤效果；体外实验结果表明BBP能够抑制肺癌细胞系的增殖并且能够降低促癌因子的表达；体内研究表明BBP能够抑制荷瘤小鼠肿瘤体积并延长其生存期，其通过增加肿瘤组织中杀伤性CD8+T细胞作用并恢复抗肿瘤免疫反应；并且BBP与anti-PD-L1抗体联用增加肿瘤微环境中CD8+T细胞及M1型巨噬细胞浸润量，能够增强anti-PD-L1抗体的抗肿瘤作用。 结论：BBP能够抑制非小细胞肺癌的增殖,通过增加肿瘤微环境中杀伤性CD8+T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用抑制肿瘤的增殖，并增敏anti-PD-L1抗体作用，为中药联合anti-PD-L1抗体奠定基础。
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