摘要
研究背景 系统性硬化症（SystemicSclerosis，SSc）是一种临床表现多样、多器官受累的自身免疫病。它的主要特征就是由细胞外基质成分（如胶原蛋白）过度沉积导致的皮肤和内脏器官纤维化，并伴有血管病变。系统性硬化症虽然罕见，但患病率在逐年增加，且死亡率在所有风湿性疾病中位列第一，而肺部受累是大部分患者的主要死亡原因。目前用于治疗相关间质性肺病的药物选择有限，亟待寻找更多潜在治疗药物。 JAK-STAT信号传导协调免疫系统反应，并在由细胞因子驱动的各种自身免疫性疾病中发挥关键作用。近年来，以托法替布和巴瑞替尼为代表的JAK抑制剂在改善各种自身免疫性疾病的临床体征和症状方面显示出有希望的功效。尽管系统性硬化症的发病机制尚未明确，但目前发现在疾病过程中多种不同类型的细胞以及各种促炎、促纤维化的细胞因子和趋化因子共同发挥作用。其中巨噬细胞、TGF-β等被证实在SSc发病过程中占据重要地位。 综上所述，JAK-STAT信号通路、巨噬细胞及相关细胞因子可能在系统性硬化症相关间质肺发病机制中起重要作用。为了阐明此假说，本课题拟从体内和体外两个方面，探究托法替布和巴瑞替尼对SSc-ILD治疗潜能及可能的作用机制。 研究方法与结果 一、体内研究 通过构建SSc-ILD模型小鼠，观察托法替布和巴瑞替尼在不同给药时间下对炎症和纤维化的治疗效果;观察JAK通路表达水平;检测小鼠肺组织各种细胞因子和趋化因子的表达。 研究发现，（1）28天未治疗小鼠与对照组相比肺组织Masson染色及α-SMA荧光染色皆显著增强，SSc-ILD模型构建成功;（2）托法替布和巴瑞替尼皆能改善SSc-ILD模型小鼠肺纤维化程度，其中巴瑞替尼具有更强的疗效，而托法替布具有更好的抗炎效果，但都需要在炎症阶段即开始使用;（3）JAK1通路在这过程中可能发挥主要作用;（4）7天及28天小鼠肺组织中TGF-β1以及GDF15表达增多，而托法替布和巴瑞替尼治疗可以做到有效抑制;（5）在巴瑞替尼和托法替布的治疗组中，小鼠肺组织的部分细胞因子水平有所变化。 二、体外研究 为进一步验证巨噬细胞表达的细胞因子对肺纤维化的影响，通过将给药与不给药情况下巨噬细胞上清液与肺成纤维细胞共培养，观察成纤维的增殖和迁移，以此探究巨噬细胞上清液中细胞因子对成纤维细胞的影响机制。 研究发现，（1）巴瑞替尼和托法替布对巨噬细胞的增殖无显著影响;（2）巨噬细胞上清液与成纤维细胞共培养条件下，成纤维细胞的增殖、迁移均被促进;（3）使用托法替布/巴瑞替尼处理过的巨噬细胞重复上述实验，与未使用药物处理组相比成纤维细胞的增殖、迁移均被抑制;（4）巨噬细胞分泌的各种细胞因子与上述现象密切相关。 结论 本研究证实，托法替布和巴瑞替尼在SSc-ILD小鼠模型中皆有抗纤维化效果，其中巴瑞替尼的疗效更加显著，托法替布具有更好的抗炎效果，但都需要在炎症早期开始使用;JAK1途径可能在其中发挥主要作用;巨噬细胞、TGF-β以及各种细胞、趋化因子同样发挥作用。
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