摘要
背景:炎症性肠病是一种以肠道慢性非特异性炎症为主要表现的免疫相关性疾病，其发病机制表现为遗传易感性人群中由共生菌介导的异常的免疫反应。现有的药物难以维持疾病长期的缓解，且反复用药促进患者的药物耐受。因此研发疗效肯定的机制不同于现有的药物至关重要。苯烯莫德是一种新型非甾体类小分子药物，其作为芳香烃受体的激动剂，能调节免疫，抑制多种炎症因子的表达。芳香烃受体分布广泛，能接受炎症因子、环境中某些有毒化合物及内源性芳香烃配体的信号，并被激活，促进下游基因的表达，从而引起相应的生物学效应。其作用效果由其基础表达水平和环境中芳香烃受体的配体含量决定，且其激活机制复杂，和该蛋白的表达含量并无直接关系。芳香烃受体可与泛素蛋白结合实现降解。然而，芳香烃受体的泛素化修饰是否为苯烯莫德实现其药效的机制，有待进一步研究。 目的:本研究旨在体内和体外水平探讨苯烯莫德对炎症性肠病的治疗机制。 方法:本研究通过体内试验，给予小鼠灌肠，通过测量体重、疾病活动指数、结肠长度来证明苯烯莫德的治疗作用。体外模型中，根据AhR的表达水平，筛选出NCM460、LoVo两株细胞，加H9细胞分别测试了苯烯莫德刺激后细胞的增殖凋亡水平，并通过构建AhR稳转细胞株，验证苯烯莫德的作用与AhR的水平的关系。进一步，结合体内实验，通过屏障试验、紧密连接蛋白的检测，证明了苯烯莫德、AhR对屏障的作用，另一方面，苯烯莫德、AhR对免疫的影响，通过检测条件敲除小鼠（VillinCre/CD4Cre）固有层淋巴细胞CD4+AhR+细胞群的含量，苯烯莫德对基因敲除小鼠固有层淋巴细胞的凋亡水平的影响实现。最后通过检测下游通路指标和研究AhR的泛素化水平实现对苯烯莫德作用的分子机制部分探索。 结果:1.用氢氧化钠溶解苯烯莫德可提高对炎症性肠病的疗效，改善全身症状，并能减缓肠炎相关性肠癌的进展;2.苯烯莫德能维持肠道屏障完整性，通过AhR促进正常肠上皮增殖，抑制肿瘤细胞增殖;3.苯烯莫德对小鼠免疫具有一定的AhR介导的抑制作用;4.AhR提高组织对炎症因子的敏感程度，低表达AhR预示炎症减轻;5.苯烯莫德通过下调泛素化水平调控AhR的活性进而影响下游HIF-1α水平。 结论:新型苯烯莫德灌肠液对炎症性肠病具有治疗作用，通过有效性和安全性检验，其促进AhR介导的肠道屏障的完整性及促炎细胞的凋亡。因此，苯烯莫德可能成为未来治疗炎症性肠病的潜在药物。
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