摘要
右旋糖酐蔗糖酶是单一性水解蔗糖，通过受体反应生产低聚糖或右旋糖酐的一种酶，在生物合成中起到重要的作用。本文从泡菜中筛选得到一株产右旋糖酐蔗糖酶的菌株NW02。对其生长、产酶条件、酶学性质进行了研究，并制备了磁性MgAl-LDHs，对右旋糖酐蔗糖酶与右旋糖酐酶在磁性MgAl-LDHs上进行固定化研究，分析了其酶解产物。结果如下： 从自制泡菜中筛选到4株产右旋糖酐蔗糖酶菌株。其中产右旋糖酐蔗糖酶能力最强的菌株NW02，该菌株菌落光滑湿润，边缘圆滑整齐无波状凸起，灰白色，小于1mm。革兰氏阳性，椭圆状。对其进行了形态学特征、生理生化特征以及16SrDNA序列分析，构建系统进化树，该菌株鉴定为Leuconostocsp.NW02。最适生长温度为30℃、最适生长pH为7.5，培养基蔗糖含量8%的情况下生长速率最快。 研究了菌株NW02的量最高。其生产的多糖有一定的抗氧化活性，在1mg/mL时，对DHHP、超氧阴离子和羟基自由基有超过20%的清除能力。 对NW02所产右旋糖酐蔗糖酶的酶学性质进行研究，该酶最佳的作用温度及pH为25℃和pH7.5；在温度为20℃，pH7.5-8.0能够保持稳定。该右旋糖酐蔗糖酶的特异性底物为蔗糖。高效液相色谱的结果表明右旋糖酐蔗糖酶的产物为麦芽三糖、麦芽四糖和葡聚糖等。 对磁性纳米MgAl-LDHs固定化酶进行了研究，用水热法制备了纳米磁珠，并用共沉淀法将MgAl-LDHs结合在磁珠上制备了Fe3O4@MgAl-LDHs。其比表面积约为4m2/g，适合吸附固定酶。当右旋糖酐酶和右旋糖酐蔗糖酶以不同比例固定化在载体上时，对其产物进行分析后发现，随着右旋糖酐酶和右旋糖酐蔗糖酶比例的变化，产物中寡糖的比例也随之变化。结果表明，在固定化酶中，调节两种酶的比例，可以调控酶解产物中寡糖的聚合度。
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