摘要
骨癌痛（Bone cancer pain,BCP）是癌症病人最常见的疼痛类型之一，严重影响着癌症晚期患者的生活质量。骨癌痛的发病机制目前尚不明确，因此探究其发病机制，寻找新的潜在治疗靶点显得更加迫切。脊髓是疼痛信号传导和局部加工的初级中枢，痛觉形成的先决条件之一就是脊髓背角神经元兴奋性的改变。细胞内外钙离子浓度的动态平衡是神经元维持正常兴奋性的重要条件。钙稳态调节蛋白2（Calcium homeostasis modulator2,Calhm2）是一种跨膜蛋白，其广泛分布于细胞膜上，它可以调节细胞内的钙离子浓度，在调控神经元兴奋性中有重要作用。钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱα（Calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡα,CaMKⅡα）是一种常见的多功能蛋白激酶，CaMKⅡα的表达上调在疼痛的发生过程中起着重要的作用。 目的: 本课题旨在探究骨癌痛发生时，Calhm2在骨癌痛发生发展中的作用及其潜在机制。 方法: 将C57BL/6J小鼠随机分为：假手术组（Sham）、骨癌痛组（BCP）、骨癌痛+阴性对照病毒组（BCP+CON-LV）、骨癌痛+干扰病毒组（BCP+Calhm2-LV）组。BCP组小鼠右侧胫骨平台注射小鼠肺癌细胞悬液，Sham组小鼠则注射生理盐水。BCP+CON-LV组和BCP+Calhm2-LV组则在BCP造模后分别接受对照病毒及Calhm2干扰病毒的脊髓背角注射。在造模前及造模后的第7、14、21天测定各组小鼠右足机械痛阈，并同时取材，使用RT-PCR、Western Blot等实验手段测定Calhm2和CaMKⅡα在脊髓腰膨大中的表达变化。利用免疫组化检测Calhm2与CaMKⅡα、c-fos的共定位情况，以及Calhm2-LV对Calhm2表达的干扰情况。 结果: 1.Calhm2在骨癌痛小鼠脊髓背角中表达量上调，Calhm2下调有助于缓解骨癌痛。 2.Calhm2与CaMKⅡα在小鼠脊髓背角神经元存在共定位。 3.CaMKⅡα在骨癌痛小鼠脊髓背角中表达量上调，干扰Calhm2的表达会导致CaMKⅡα表达下调。 4.c-fos在脊髓背角差异性表达。 结论： Calhm2通过调控CaMKⅡα促进脊髓背角神经元活化参与骨癌痛的发生。
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