摘要
目的：1.研究CCNB1（CyclinB1）在正常肺组织和肺腺癌组织的表达差异，分析其与临床病理特征及预后的关系。 2.在肺腺癌细胞株中下调CCNB1的表达后，RNA-Seq检测细胞转录水平的变化，初步探索其作用机制。 方法：1.免疫组化检测CCNB1在94例肺腺癌和30例正常组织的表达，统计分析肺腺癌中CCNB1的表达与临床病理参数的关系，利用单因素和多因素分析CCNB1作为预后指标的可行性。 2.qRT-PCR法检测4株肺腺癌细胞株CCNB1的本底表达水平，选择相对高表达的细胞株作为后续研究对象。 3.从合成CCNB1的siRNA中筛选最佳干预片段，进一步在上述细胞中干预CCNB1的表达。 4.用高通量转录组测序（RNA-Seq）技术检测其转录本变化，并通过GO分析、KEGG通路分析初步研究其调控机制。 结果：1.与正常组织相比，CCNB1在肺腺癌组织中表达较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。 2.CCNB1表达与肺腺癌患者不良预后相关（P＜0.05）。 3.CCNB1表达与年龄、性别、吸烟状况、肿瘤大小、分化级别、T分期、淋巴结状态、远处转移状态、病理分期、脏层胸膜侵犯、支气管切缘、肿瘤大体类型无相关性（P＞0.05）。 4.单因素Log-rank检验表明，病理分期、T分期、分化程度、淋巴结转移状态、CCNB1的表达均为影响其预后的重要因素（P＜0.05）。多变量分析表明，T分期和CCNB1表达是肺腺癌的独立预后指标（P＜0.05）。 5.在男性、肿瘤直径≤4cm、年龄≤55，T3+T4期、无淋巴结转移、Ⅰ+Ⅱ期或吸烟的患者中，CCNB1高表达与较差的OS相关（P＜0.05）。 6.在4种肺腺癌细胞中，CCNB1在H1299细胞株中表达最高。 7.RNA-Seq测序结果表明，降低CCNB1的表达后，有135个基因发生了转录本水平的变化，包括59个下调基因和76个上调基因。 8.GO富集分析表明CCNB1的表达影响丝氨酸/苏氨酸激酶活性。KEGG通路分析显示，差异基因主要参与PPAR和Ferroptosis信号通路。蛋白互作分析提示，CCNB1与NEK7、PLK2、PTMK和CDC42之间存在关联。 结论：CCNB1在肺腺癌组织中过表达，可以作为肺腺癌的独立预后因素。在年龄≤55岁、男性、肿瘤直径≤4cm、T3+T4期、Ⅰ+Ⅱ期、无淋巴结转移或吸烟的患者，CCNB1高表达提示更加不良的预后。其可能是通过影响丝氨酸/苏氨酸激酶活性或调节PPAR和Ferroptosis信号通路影响肺腺癌的发生发展。
NETL