摘要
纳米硒是纳米级的单质硒，具有较高的生物安全性、抗氧化活性和抑菌性能，利用微生物合成的纳米硒，具有绿色安全、环保无污染、产量高、成本低、低毒性等多种优势。 本论文从土壤中分离纯化得到一株高效合成纳米硒的菌株，在5mmol/L亚硒酸钠LB培养基中，该菌株对亚硒酸钠的还原率可达到65.7%，其对亚硒酸钠的耐受能力为80mmol/L。通过生理生化鉴定和16SrDNA基因序列比对，将此高效合成纳米硒的菌株命名为：Bacillusparamycoides1805（B.paramycoides1805）。 对B.paramycoides1805生长特性的研究发现，该菌最佳生长条件为30℃、pH6、200r/min。在对其还原亚硒酸钠效率的研究中发现，该菌株可在24h内将2mmol/L的亚硒酸钠充分还原成纳米硒单质。针对亚硒酸钠合成，进行单因素优化和响应面优化，B.paramycoides1805在37℃、pH6、140r/min条件下24h还原亚硒酸钠的转化率为99.12%。前期研究发现B.paramycoides1805只能耐受80mmol/L的亚硒酸钠，不利于实际应用，采用适应性进化育种技术，选育出具有更高耐受的优良菌株。结果表明，B.paramycoides1805在液体和固体平板中亚硒酸钠的耐受性分别达到190mmol/L和140mmol/L，提高了137.5%和75%。 B.paramycoides1805细胞膜和细胞壁是合成纳米硒的场所，分离纯化得到纳米硒，经过粒度分析仪、扫描电镜及EDX元素分析，发现纳米硒颗粒呈球状，粒径均匀（150nm左右），成分单一。进一步研究发现该纳米硒具有良好的抗氧化活性和抑菌效果：纳米硒对DPPH自由基清除能力达到72.79%，对金黄色葡萄球菌与大肠杆菌具有明显的抑菌效果，该研究成果为进一步开发利用该菌株合成纳米硒提供理论依据和技术保证。
NETL