摘要
目的: 1.通过系统回顾既往益气活血类药物治疗急性心肌梗死(AMI，acutemyocardialinfarction)的随机对照试验(RCT,randomizedcontrolledtrial)，评价益气活血类药物对AMI后心室重构、患者中医证候及远期预后的影响。 2.通过RCT研究，观察益气活血中成药通冠胶囊对AMI后患者心室重构及主要不良心血管事件(MACE，majoradversecardiovascularevents)的疗效。 3.通过蛋白组学研究，分析通冠胶囊对AMI后心室重构影响的差异蛋白。 4.通过综合既往研究、公共数据库挖掘及蛋白组学研究结果，应用网络药理学方法探索通冠胶囊作用于AMI后心室重构的主要成分及作用机制。 方法: 第一部分研究方法:荟萃分析(Meta-analysis)通过计算机对PubMed、Cochrane图书馆、EMBASE、Webofscience、国家知识基础设施数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国学术期刊数据库（万方）、中文科技期刊数据库（维普）进行文献检索，检索时限为建库至2022年03月01日。纳入随访时间≥3个月，样本量≥50例的益气活血类药物治疗AMI的RCT研究。纳入文献需报告了左心室射血分数(LVEF,leftventricularejectionfraction)，同时至少还需报告左心室舒张末期容积指数(LVEDVi，leftventricularend-diastolicvolumeindex)、左心室舒张末期容积(LVEDV,leftventricularend-diastolicvolume)、左心室收缩末期容积指数（LVESVi，leftventricularend-systolicvolumeindex）和左心室收缩末期容积(LVESV,leftventricularend-systolicvolume)四个指标其中之一。其它指标包括:B型利钠肽(BNP,Btypenatriureticpeptide)、N末端B型利钠肽前体(NT-proBNP,NterminalproBtypenatriureticpeptide)、MACE事件及中医气虚血瘀证候积分。根据Cochrane系统评价员手册5.1.0版本提供的评价标准进行文献质量评价后，应用Stata12.0分析软件进行合并分析，同时进行异质性检验、敏感性分析及发表偏倚检验。 第二部分研究方法:通过RCT研究纳入STEMI并经PCI治疗后成功开放梗死相关动脉的受试者。将受试者随机分为通冠胶囊组和对照组，于PCI术后第一天给予相应治疗。通冠胶囊组受试者在指南推荐的常规治疗基础上每日口服通冠胶囊3次，每次3粒（1.5克）;对照组受试者仅接受指南推荐的常规治疗，疗程均为6个月。于入组后第1天和第6个月末，对所有参与试验的受试者进行心脏超声评估，并记录整个随访期间患者的MACE事件。临床资料使用SPSS19.0（IBMCorp.）进行数据统计处理，采取双侧检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。 第三部分研究方法:蛋白组学研究中，采集以上RCT研究中各组受试者随访第6个月末的血清样本，每组5例。对涉及血管生成、生长、免疫、炎症、增殖、迁移、粘附、趋化、分化、细胞死亡及凋亡等作用的108个蛋白进行蛋白组学检测。使用R3.6.1进行数据处理，采用ANOVA与Moderatedt-statistic两种统计学方法进行统计分析。以组间差异P＜0.05且差异倍数(FC，foldchange)＞1.5，或P＜0.05且FC＜0.67确定差异蛋白。对ANOVA与Moderatedt-statistic分析结果进行Veen图分析，获得通冠胶囊作用于AMI后心室重构的差异蛋白。 第四部分研究方法:在蛋白组学研究结果的基础上，结合既往通冠胶囊治疗AMI后心室重构作用靶点总结和数据库挖掘结果，应用网络药理学研究方法，初步探索通冠胶囊对AMI后心室重构的作用机制及其网络。既往通冠胶囊治疗AMI后心室重构的作用靶点由文献检索获得，检索数据库分别为:PubMed、EMBASE、Webofscience、CNKI、CBM、万方、维普数据库。数据库挖掘中，首先通过TCMSP和Synmap公共数据库检索、文献检索以及通冠胶囊质谱检测确定通冠胶囊的化合物成分;然后利用以上化合物MolID及SMILES结构于TCMSP数据库、STITCH数据库、SwissTargetPridiction数据库、SEA数据库进行通冠胶囊化合物靶点垂钓;最后分别通过Genecards数据库与DisGeNET数据库综合确定“acutemyocardialinfarction”与“ventricularremodeling”相关靶点，取“acutemyocardialinfarction”与“ventricularremodeling”相关靶点的交集为AMI后心室重构的疾病靶点。提取通冠胶囊的化合物靶点与AMI后心室重构的疾病靶点交集部分即为通冠胶囊作用于AMI后心室重构的潜在靶点。使用Cytoscape3.9.0软件构建药物-化合物-疾病靶点网络，并通过网络拓扑结构分析确定各节点连接度，筛选通冠胶囊作用于AMI后心室重构的主要化合物。将通冠胶囊作用于AMI后心室重构的潜在靶点输入HINT数据库构建关系网络，通过拓扑结构分析以Degree≥10确定通冠胶囊作用于AMI后心室重构潜在靶点的核心部分。将其与既往通冠胶囊治疗AMI后心室重构的作用靶点和蛋白组学研究中获得的差异蛋白合并，确定通冠胶囊作用于AMI后心室重构的核心靶点。将核心靶点输入HINT数据库中构建核心蛋白质-蛋白质相互作用(PPI,protein-proteininteraction)网络，并通过Cytoscape软件进行网络分解及可视化。将核心靶点输入DAVID网站进行KEGG通路及GO富集分析，获得通冠胶囊作用于AMI后心室重构的生物学过程、分子功能、细胞组分和KEGG信号通路（P＜0.01）。 结论: 1.益气活血类药物干预可抑制AMI后患者心室重构，提高心脏功能，降低气虚血瘀证候积分和MACE事件发生率，改善远期预后。 2.通冠胶囊可抑制AMI后患者心室重构，提高心脏功能，降低MACE事件发生率，改善远期预后。 3.通冠胶囊作用于AMI后心室重构的差异蛋白分别为:BMPR1B、DLK1、GDF-15、MDK和SPP1。 4.通冠胶囊作用于AMI后心室重构的主要化合物有槲皮素、木犀草素、山奈酚、丹参酮ⅡA、丹酚酸B、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮等。 5.通冠胶囊抑制AMI后心室重构的作用与细胞内外多种细胞器及复合物相关。通冠胶囊通过调控细胞因子结合和相关激酶活性参与AMI后心室重构中炎症反应、细胞凋亡及自噬等多种生物学过程，其作用主要涉及对MAPK通路和Hippo通路的信号调节。
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