摘要
目的: 阿尔茨海默病(Alzheimerdisease，AD)是一种退行性脑病，悄无声息的发生，在潜移默化中逐渐降低患病者的记忆力、认知能力。症见记忆衰退、性情变化、逻辑无序、动作迟缓，甚至自理能力完全丧失。我国步入老龄化社会，AD的发病率持续上升，随着青壮年人口红利的消失，由AD引发的社会问题将日益突出。目前已知的针对AD的西药，如胆碱酯酶抑制剂、NMDA受体拮抗剂、Aβ抑制剂、Tau蛋白靶点药物对本病的疗效均是十分有限的。新药的研发上频频碰壁，甚至某些西药在临床使用过程中发现其带来的严重不良反应或毒副作用而不得不退出历史的舞台。而某些中医方药展现出对AD良好的特性。中医的优势在于标本兼治，治病求根本，且毒副作用小。所以对于中医方药的挖掘及验证势在必行。生慧汤出自清代陈士铎《辨证录》“健忘门”，具有益气养血、交通心肾的作用，被喻为“治健忘之圣药”。导师祝维峰教授在古方基础上进行了精心化裁，巧妙配伍，形成加味生慧汤。实现标本兼顾、虚实同治。本研究分别从临床试验与动物实验二方面对加味生慧汤的治疗效果进行评价。临床试验采用随机对照的实验方法，通过患者服药后认知功能、日常生活能力、中医证候变化的情况来评价加味生慧汤的疗效。为探寻加味生慧汤的功效以及中医治疗AD提供依据。动物实验分别从AD模型小鼠的行为学变化、小鼠大脑海马组织病理学形态变化、海马组织中Aβ1-42沉积情况、对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响几方面来探寻加味生慧汤干预AD的效果。 方法: 临床试验: 本研究纳入轻、中度AD患者76例，随机分为中、西药组。脱落16例，最终完成研究60例，每组各30例。西药组使用盐酸多奈哌齐治疗，中药组使用加味生慧汤治疗。治疗时间均为12周。分别从患者整体认知功能（以MMSE量表及ADAS-Cog量表得分来评估）、中医证候变化情况（PES-D/11量表评估）、日常生活活动能力(ADL量表评价)来进行药效的评价。并对服药安全性、患者依从性进行评价。 动物实验: 实验一:加味生慧汤对AD模型小鼠的学习记忆能力的影响。6月龄雌性APP/PS1小鼠30只，随机分为模型组、西药组、中药组，每组10只。以同龄雌性野生型C57BL/6J小鼠10只作为正常组。西药组予盐酸多奈哌齐灌胃，中药组予加味生慧汤灌胃，正常组和模型组予生理盐水灌胃。连续灌胃30天。利用Morris水迷宫实验（定位航行实验和空间探索实验）观察加味生慧汤对AD动物学习记忆能力的影响。实验二:观察加味生慧汤对APP/PS1小鼠海马区的组织病理改变及Aβ1-42沉积的影响。小鼠在水迷宫实验完毕后，取全脑剥离出海马组织，石蜡包埋及切片。按照HE染色及免疫组化所要求的实验步骤对组织切片完成HE染色及对Aβ1-42的免疫组化。显微镜镜检，图像分析。并评价各组Aβ1-42积分光密度值。实验三:加味生慧汤对AD小鼠PI3K/AKT/mTOR通路的影响。将各组小鼠的新鲜海马组织按照westernblot的检测方法，检测PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达情况。 结论: 1.本研究显示加味生慧汤提升了轻中度AD患者MMSE、ADL的得分，降低了ADAS-Cog的得分，对AD患者的语言能力、专注能力、定向力、回忆能力、实践能力、日常生活活动能力均有改善作用。对中医证候方面的影响，西药多奈哌齐仅对髓减证候有所改善，对其余痴呆常见证候肾虚、脾虚、血虚、气虚、阳亢、毒盛、痰浊、血瘀均无改善作用。加味生慧汤除未见对血虚证候的改善，对其余8种常见证候均有改善作用，尤其是对髓减、痰浊的改善，最为明显。大多数患者对加味生慧汤依从性良好。且该方临床安全性高，具有较好的临床使用前景，值得推广。 2.APP/PS1模型小鼠存在明显记忆和空间定向能力损害。加味生慧汤与多奈哌齐均可以改善APP/PS1小鼠记忆和空间定向能力，效果相似。加味生慧汤、多奈哌齐均可以在一定程度上抑制AD引起的病理改变，抑制AD小鼠海马区域Aβ1-42聚集的作用，起到保护海马区神经的作用。模型组PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白水平明显增高，说明PI3K/Akt/mTOR与AD发病密切相关。予加味生慧汤可减低PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白的表达，抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路。
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