摘要
目的：研究SAG在黑色素瘤中的抗转移作用和基本分子机制，为开发新的抗黑色素瘤药物提供科学依据。 方法：利用CCK8检测法确定SAG对A375和A2058细胞增殖的抑制作用。然后，应用网络药理学分析，构建“化合物-靶标-通路”（Compound-Target-Pathway，“C-T-P”）网络以及“蛋白质-蛋白质相互作用”（Protein-ProteinInteraction，“PPI”）网络，并筛选出SAG对黑色素瘤的潜在治疗靶点。使用Autodock和Pymol对选定的目标进行了分子对接。利用细胞划痕实验、细胞基质黏附实验和Transwell侵袭实验考察了SAG对黑色素瘤细胞迁移、粘附及侵袭的影响；Westernblot实验对筛选出的核心靶点及相关通路进行验证；利用小鼠体外成瘤实验证实SAG对黑色素瘤生长的抑制，肿瘤组织免疫组织化学染色验证了几个核心靶点在SAG治疗后的变化。 结果：网络药理学和分子对接的结果表明，FAK，PI3K，AKT是SAG抗黑色素瘤的核心靶点。CCK8实验，细胞划痕实验，细胞基质黏附实验和Transwell侵袭实验证明了SAG对A375和A2058细胞的增殖、迁移、粘附和侵袭有显著影响，并且具有一定的剂量依赖性；裸鼠体外成瘤实验证明了SAG能有效减少肿瘤的生长；WB和IHC染色的结果表明，SAG在体内外均可抑制p-FAK、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表达程度。结合网络药理学和分子对接模拟的结果，FAK信号通路FAK/PI3K/AKT/mTOR是SAG对黑色素瘤发挥作用的主要途径。 结论：SAG作用于FAK-PI3K-AKT-mTOR信号通路而抑制黑色素瘤细胞的迁移、粘附和侵袭性，从而发挥抗黑色素瘤转移作用。
NETL