摘要
甜瓜(CucumismeloL.)是重要的葫芦科经济作物，我国年栽培面积约40万hm2。病毒病是影响甜瓜产业发展的重要因素。南瓜蚜传黄化病毒（cucurbitaphid-borneyellowsvirus，CABYV）作为甜瓜中最流行的病毒病之一，已成为限制我国尤其是西北地区甜瓜产业发展的重要因素，种植抗病品种一直是防控病毒病最根本有效的途经。明确甜瓜对CABYV的抗性，为育种工作提供理论基础，对于防治CABYV在甜瓜上的发生和流行具有重要意义。本研究构建了CABYV全长基因组cDNA侵染性克隆，分析了寄主抗性与病毒积累量关系，筛选了与病毒编码蛋白互作的寄主蛋白，主要研究结果如下： 1.成功构建了CABYV侵染性克隆。以CABYV甜瓜分离物CABYV-WS为研究对象，通过RT-PCR扩增、拼接获得全基因组序列，该分离物基因组全长为5682nt，GenBank登录号为MW752438。利用同源重组技术获得含有CABYV-WS全基因组的cDNA克隆pCABYV-WS，通过接种检测，发现接种植株可以产生典型的黄化症状，并且发病叶片中存在病毒基因组RNA（genomicRNA，gRNA）和亚基因组RNA（subgenomicRNA，sgRNA）的积累，与野生型一致，证实CABYV侵染性克隆构建成功。 2.筛选到两个超感品种和一个抗性品种，并分析了抗性与病毒积累量的关系。基于侵染性克隆接种法对8个不同甜瓜品种进行抗性分析，筛选到2个对CABYV特别敏感的甜瓜品种‘新密杂11号’和‘新密25号’和1个抗性品种‘黄梦脆’。2个超感品种在接种两周左右即可开始显症，并且发病率可达100%。‘黄梦脆’在整个过程中不表现症状。通过qRT-PCR和NorthernBlot技术对不同抗性甜瓜品种病毒积累量进行检测，证实抗性与病毒积累量呈负相关。 3.利用酵母双杂交技术筛选到与P0互作的蛋白半乳糖基转移酶7（Galacturonosyltransferase7，GAUT7）和甘氨酸脱氢酶（Glycinedehydrogenase，GDH），与MP互作的蛋白叶绿体转录终止因子（Transcriptionterminationfactor，TERF）。
NETL