摘要
高血压是心血管疾病的重要风险因子，其发病率逐年上升。而肾素-血管紧张素-醛固酮系统对血压的调控起着至关重要的作用，其主要功能是调节和维持人体血压、水、电解质的平衡，维持内环境的相对稳定，过度激活的肾素-血管紧张素-醛固酮系统是高血压形成的原因之一。本研究考察了四种市场上常见品种橄榄的肾素及血管紧张素转换酶（ACE）抑制活性、抗氧化能力及总酚和总黄酮含量；同时研究了不同溶剂对橄榄提取液活性的影响，并进行了相关性分析，探究主要化学成分与活性之间的联系，探讨发挥双重抑制作用的物质类型；进一步分离纯化得到具有肾素和ACE双重抑制作用的单一活性组分，解析其酶抑制类型，并通过液质联用得到了结构的相关数据，以期为橄榄制品的开发及食源性肾素和ACE抑制剂的研究提供基础理论依据。 不同品种的橄榄水提物均显示出良好的肾素和ACE抑制活性，在0.5μg/μL浓度条件下，肾素抑制率均达到了70%以上，其中惠圆橄榄的肾素抑制率最高，为83.93%；在0.29μg/μL浓度条件下，橄榄的ACE抑制率均达到了80%以上，其中惠圆橄榄的ACE抑制率最高，为94.75%。机体的氧化损伤对高血压的发生发展关系密切，进一步研究表明，四种所试橄榄样品亦表现出良好的抗氧化能力，其中檀香橄榄的抗氧化能力最强，其ABTS自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、铁离子还原能力分别为182.64、140.64和251.65mgTE/gDW，三棱橄榄抗氧化能力次之。同时，檀香橄榄总酚含量最高，为274.56mgGAE/gDW，乌榄中总黄酮含量最高，为52.64mgCE/gDW。 进一步选用70%甲醇、60%乙醇、60%丙酮以及纯水等四种溶剂对檀香橄榄中的活性成分进行提取。在相同浓度条件下有机溶剂提取液的肾素及ACE抑制活性普遍较高，其中甲醇提取物的肾素抑制活性达到95.89%，丙酮提取物的ACE抑制活性达到92.71%。与肾素和ACE抑制活性类似，抗氧化能力方面，有机溶剂提取物亦表现出较强的活性，其中活性最强的丙酮提取物的ABTS自由基清除能力、DPPH自由基清除能力和铁离子还原能力分别为384.86、309.23和479.40mgTE/gDW。同时丙酮提取物中总酚和总黄酮含量均为最高，分别为318.14mgGAE/gDW和45.46mgCE/gDW。Pearson相关性分析显示肾素和ACE抑制率与总酚含量相关性显著，推测酚类物质对橄榄的肾素和ACE抑制作用发挥着重要贡献。 采用大孔吸附树脂层析及高效液相色谱分析，对檀香橄榄提取物中的肾素和ACE抑制活性成分进行分离纯化，得到具有高肾素和ACE抑制活性的单一组分F1、F2、F3。其中组分F1的分子量为269.11m/z，抑制肾素和ACE的IC50值分别为161.08和48.85μM；组分F2的分子量为206.10m/z，抑制ACE的IC50值为174.28μM；组分F3的分子量为570.19m/z，抑制肾素和ACE的IC50值分别为9.63和64.39μM。结合文献报道，推断组分F2为6,7-二甲氧基香豆素。组分F1和F3表现出肾素和ACE双重抑制作用，且对肾素和ACE的抑制类型均为反竞争性抑制，这为深入探讨橄榄中的血压调控因子提供了重要依据。
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