摘要
天然植物饮料是多酚等生物活性物质的重要膳食来源。茶（Camelliasinensis）叶及湖北海棠（Malushupehensis）叶为我国常见的茶饮和代茶饮，本文以茶叶加工过程中产生的茶末和湖北海棠叶为原料，研究了多酚等活性成分的提取和纯化工艺，并对提取物的化学成分进行了鉴定，同时还考察了茶末和湖北海棠叶不同极性提取物抗氧化、降血糖、降血脂等生物活性，以期为相关产品精加工和应用提供理论依据。具体结论如下： （1）采用逆流萃取法一步浸提茶末中茶多酚、茶氨酸和茶多糖类三种活性成分：通过浸提剂筛选以及浸提级数筛选，确定乙醇溶液为浸提剂进行三级逆流萃取；通过单因素试验确定最优浸提条件，提取茶多酚最佳浸提工艺为：料液比1∶20（g/mL），提取温度85℃，乙醇浓度为60%，提取时间60min，茶多酚实际提取率为31.35%，提取物中茶氨酸干态物质百分比为3.68%、茶多糖提取率为12.25%，证实了优化工艺的有效性。 （2）采用液液萃取与树脂吸附相结合的工艺对茶末提取物进行纯化：提取物经乙酸乙酯萃取，分离出茶多酚；应用732阳离子交换树脂分离水相中的茶氨酸与茶多糖，当树脂前处理pH=2.0时，茶多糖保留率为87.81%，茶氨酸吸附率为75.89%；使用pH=8.0的磷酸缓冲溶液洗脱茶氨酸，洗脱率为96.47%。经筛选应用聚酰胺树脂纯化茶多酚，通过单因素试验确定优最佳纯化工艺为洗脱液体积75BV、洗脱液pH=8、洗脱液为80%乙醇，此条件下茶多酚洗脱率为88.21%，茶多酚纯度为75.03%。 （3）考察茶末和湖北海棠叶中不同极性萃取物的体外抗氧化活性、胰脂肪酶抑制率、α-淀粉酶抑制率、体外模拟消化中多酚释放率及对于HepG-2细胞增殖抑制率等生理活性。结果表明，不同有机物萃取相均可有效清除DPPH、ABTS自由基，具有较强的抗氧化活性，且EAF（乙酸乙酯萃取相）抗氧化活性显著高于其他组分；相同浓度下，HTEAF（湖北海棠叶多酚乙酸乙酯萃取相）具有最高的胰脂肪酶抑制率（IC50=0.03mg/mL），其次是CEAF（茶多酚乙酸乙酯萃取相），IC50=0.89mg/mL；相同浓度下，HTEAF的α-淀粉酶抑制率最高（IC50=0.22mg/mL），其次是CEAF（IC50=1.29mg/mL）；体外模拟消化试验表明，90min模拟胃消化试验中海棠叶多酚的最大浓度59.28mg/mL为胃消化5min（28.51mg/mL）的2.08倍，是盐酸最大释出量（42.59mg/mL）的1.39倍。90min模拟胃消化试验中茶多酚的最大浓度54.71mg/mL为胃消化5min（27.18mg/mL）的2.02倍，是盐酸最大释出量37.18mg/mL的1.47倍；HTEAF和CEAF均对HepG-2细胞具有明显的抗增殖作用，其中HTEAF作用敏感度较强，在低浓度下可发挥作用，CEAF在浓度达到1mg/mL时开始具有明显的抗增殖作用，在8mg/mL时抗增殖抑制率可达到91.60%。 （4）通过HPLC-MS分析，从HTEAF中共鉴定出33种化合物，从CEAF中共鉴定出16种化合物，并对其中7种含量较高化合物进行定量分析。
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