摘要
目的: 本研究基于间歇性低氧（IH）合并高脂饮食的小鼠模型，探讨IH和高脂饮食对小鼠肠粘膜损伤、肠屏障功能以及肠上皮细胞凋亡的影响，并且通过复氧前后对比，模拟阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合症（OSAHS）患者持续正压通气（CPAP）治疗效果。 方法: 构建IH合并高脂饮食小鼠模型，选用6周龄C57BL/6J雄性小鼠并随机分为四组，每组12只，给予普通饮食（CD）或高脂饮食（HFD）,在此期间，对四组小鼠进行不同处理:（1）普通饮食+常氧组（CD组）;（2）高脂饮食+常氧组（HFD组）;（3）普通饮食+间歇性低氧组（CD+IH组）;（4）高脂饮食+间歇性低氧组（HFD+IH组）。在实验6周后，采取各组小鼠肠粘膜标本进行研究。研究方法:（1）HE染色观察结肠粘膜的形态变化。（2）免疫组化染色观察结肠紧密连接蛋白ZO-1、Occludin在组织中的分布。（3）免疫荧光鉴定小鼠结肠黏蛋白层。（4）TUNEL染色观察肠上皮细胞凋亡情况。小鼠原饮食条件不变，间歇性低氧组复氧2周，再次重复上述HE染色和ZO-1、Occludin免疫组化检测，并进行分析。 结果: 小鼠IH6周后结果: 1.HE显示:CD组结肠粘膜上皮结构完好;HFD组、CD+IH组、HFD+IH组中可见结肠粘膜破坏，其中HFD+IH组结肠粘膜的破坏最为严重。 2.免疫组化显示:与CD组相比，HFD组、CD+IH组、HFD+IH组ZO-1蛋白表达水平均降低（P＜0.01）,其中CD+IH组、HFD+IH组蛋白表达水平降低更为显著;与CD组相比，HFD组Occludin蛋白表达水平稍低，差异无统计学意义，而CD+IH组、HFD+IH组Occludin蛋白表达水平降低（P＜0.05）,差异均具有统计学意义。 3.免疫荧光显示:与CD组相比，HFD组、CD+IH组、HFD+IH组结肠黏蛋白层Muc-2的表达降低，且CD+IH组、HFD+IH组Muc-2的表达降低更为显著。 4.TUNEL荧光显示:与CD组相比，HFD组肠上皮细胞凋亡率稍高，差异无统计学意义，而CD+IH组、HFD+IH组肠上皮细胞凋亡率则显著升高（P＜0.05）。 复氧2周后结果: 1.HE显示:CD+IH组和HFD+IH组的结肠粘膜破坏较复氧前减轻。 2.免疫组化显示:与复氧前比较，CD+IH组和HFD+IH组小鼠结肠ZO-1的蛋白表达显著上升，且差异均具有统计学意义（P＜0.01）;与复氧前比较，CD+IH组Occludin的蛋白表达稍高，差异无统计学意义，而HFD+IH组Occludin的蛋白表达上升，差异具有统计学意义（P＜0.01）。 结论: 1.间歇性低氧和高脂饮食均可破坏肠粘膜层的完整性，二者同时存在下这种损伤更为显著。 2.间歇性低氧和高脂饮食均可以引起小鼠结肠组织紧密连接蛋白ZO-1、Occludin表达减少，Muc-2分泌降低，二者同时存在下这种改变更为显著，且肠上皮细胞凋亡显著增加。 3.短期的复氧可以轻度改善结肠组织的病理损伤，并且使小鼠结肠组织ZO-1、Occludin表达水平有所回升。
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