摘要
目的： 为了将化疗药物成功递送至肿瘤组织，同时避免或减少伤害正常组织，我们引进铜基金属有机框架（Cu-MOF），将阿霉素（DOX）负载其中，研究基于铜基金属有机框架（Cu-MOF）的化学动力学疗法与DOX联合协同抗肿瘤作用及其机制。 方法： 1、通过简单的搅拌合成法制备了纳米级的Cu-MOF，并将其与DOX再次搅拌，使DOX负载其中，通过XRD衍射仪，透射电镜，傅里叶红外测量仪，紫外-可见吸收光谱对合成的材料进行表征； 2、观察载药纳米材料负载情况，以及在不同pH值缓冲液中的释放情况，使用不同pH缓冲液的目的是模拟正常的组织环境和微酸性的肿瘤环境； 3、在体外对载药纳米材料的毒性、靶向性以及作用机制进行了验证。利用CCK8法、Calcein-AM/PI活死细胞染色法以及细胞划痕实验检测Cu-MOF@DOX对口腔癌细胞的杀伤效果，采用激光共聚焦显微镜观察口腔癌细胞摄取纳米颗粒及细胞内活性氧（ROS）的生成情况，利用谷胱甘肽试剂盒检测癌细胞中谷胱甘肽消耗情况，利用Westernblot检测蛋白BAX和Bcl-2的表达情况。 结果： 1、制备所得的Cu-MOF、Cu-MOF@DOX纳米颗粒均呈球形结构，形态较规则、分散较均匀。XRD、傅里叶红外以及紫外可见吸收光谱则验证了Cu-MOF@DOX纳米颗粒中DOX的有效负载; 2、在Cu-MOF@DOX的药物释放实验中，我们发现在pH=5.4时，在相同时间点所释放的DOX总量明显高于pH=7.4时所释放的DOX总量，说明Cu-MOF@DOX可以在酸性环境下得到良好的释放； 3、Cu-MOF@DOX在较低浓度（DOX浓度为1μg/mL）时，就能够杀死50%左右的口腔癌细胞。与DOX相比，Cu-MOF@DOX中的DOX被细胞摄取的更多，并在细胞内能够产生大量ROS；Cu-MOF@DOX能够消耗GSH，联合释放的DOX，协同引起更多的细胞凋亡。 结论： 本实验成功制备了Cu-MOF@DOX纳米粒，实现了化疗药物DOX的靶向递送。该Cu-MOF@DOX具有良好的抗肿瘤性能，它能够选择性进入肿瘤细胞内，明显增强肿瘤细胞的杀伤效果。Cu-MOF@DOX主要通过化学动力学疗法和化疗协同作用促进口腔癌细胞凋亡，Cu-MOF@DOX在口腔癌治疗方面具有较好的应用前景。
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