摘要
研究背景： 药物成瘾又称为药物依赖，是一种慢性复发性脑病，具有强迫性用药、觅药和高复吸率等特点，药物成瘾问题给社会造成了严重的危害。 氯胺酮（Ketamine,KET）在临床上具有麻醉镇痛、抗成瘾、抗抑郁的药理作用，但氯胺酮诱导的致幻、成瘾等不良反应限制了其临床应用。先前的研究认为氯胺酮成瘾主要和N-甲基-D-天冬氨酸（N-Methyl-D-asparticacid,NMDA）受体有关，但现有研究提示阿片受体在氯胺酮的成瘾中可能发挥重要的作用。目前，由于氯胺酮成瘾的机制尚不明确，也没有有效的生物医学手段对抗氯胺酮成瘾。因此，开发能够治疗氯胺酮成瘾的药物是一项必要且有意义的工作。 噻吩诺啡（Thienorphine,Thien）作为阿片受体部分激动剂，它能够激活κ阿片受体（κ-opioidreceptor,KOR）和δ阿片受体（δ-opioidreceptor,DOR），部分激活μ阿片受体（μ-opioidreceptor,MOR），对孤儿阿片受体（Orphanopioidreceptor,NOPR）激活效应较低。噻吩诺啡具有镇痛作用且能够对抗吗啡的复吸，目前已经作为吗啡防复吸药物进入二期临床研究。噻吩诺啡能否对抗除吗啡之外的其它类型的成瘾物质，目前还没有相关的报道。 研究目的： 本课题旨在明确噻吩诺啡对抗氯胺酮成瘾的效应，阐明阿片受体在氯胺酮成瘾中的作用，为揭示氯胺酮成瘾的作用机制提供参考，为解决氯胺酮成瘾提供有效候选药物。 研究内容与方法： （1）噻吩诺啡抗氯胺酮成瘾的形成 噻吩诺啡抗氯胺酮精神依赖的形成： ①噻吩诺啡抗氯胺酮诱导的高自发活动的作用。C57BL/6J小鼠皮下给予Thien，30min后腹腔给予KET，测试30min内小鼠的自发活动。为了验证噻吩诺啡单次给药是否影响小鼠的运动活动，小鼠皮下给予Thien，测试30min内小鼠的自发活动。 ②噻吩诺啡抗氯胺酮诱导的行为敏化形成的作用。C57BL/6J小鼠皮下给予Thien，30min后腹腔给予KET，连续5天；戒断5天；第11天，各组小鼠给予KET激发，分别在第1、5、11天测试小鼠的自发活动。为了验证噻吩诺啡多次给药是否会诱导行为敏化的形成，C57BL/6J小鼠皮下给予Thien，每天一次，连续7天；戒断7天；第15天各组小鼠给予Thien激发，分别在第1、4、7、15天测试小鼠的自发活动。 噻吩诺啡抗氯胺酮躯体依赖的形成： ①噻吩诺啡抗氯胺酮急性戒断的作用。C57BL/6J小鼠皮下给予Thien，30min后腹腔给予KET，第2天重复操作，第3天侧脑室给予NMDA催促戒断。 ②噻吩诺啡抗氯胺酮慢性戒断的作用。按照剂量逐日递增的原则，C57BL/6J小鼠腹腔给予KET，每天给药三次，连续10天，每日第一次KET给药30min前皮下给予Thien，第11天侧脑室给予NMDA催促戒断。 （2）噻吩诺啡抗氯胺酮成瘾行为的重建 ①噻吩诺啡抗氯胺酮诱导的行为敏化转化的作用。C57BL/6J小鼠腹腔给予KET，连续5天；第6~10天皮下给予Thien；第11天，各组小鼠给予KET激发，分别在第1、5、11天测试小鼠的自发活动。 ②噻吩诺啡抗氯胺酮诱导的行为敏化表达的作用。C57BL/6J小鼠腹腔给予KET，连续5天；戒断5天；第11天皮下给予Thien，30min后给予KET激发，分别在第1、5、11天测试小鼠的自发活动。 （3）阿片受体在氯胺酮成瘾机制中的研究 MOR在氯胺酮成瘾机制中的作用： ①MOR敲除对小鼠诱导的自发活动的作用。MOR敲除/野生型小鼠腹腔给予KET，测试30min内小鼠的自发活动。 ②MOR敲除对小鼠诱导的行为敏化形成的作用。MOR敲除/野生型小鼠腹腔给予KET，连续5天；戒断5天；第11天，各组小鼠给予KET激发，分别在第1、5、11天测试小鼠的自发活动。 KOR在氯胺酮成瘾机制中的作用： ①KOR拮抗剂抗氯胺酮诱导的高自发活动的作用。C57BL/6J小鼠腹腔给予KOR拮抗剂nor-BNI，30min后腹腔给予KET，测试30min内小鼠的自发活动。为了验证nor-BNI是否影响小鼠的运动活动，小鼠腹腔给予nor-BNI，测试30min内小鼠的自发活动。 ②KOR激动剂抗氯胺酮诱导的高自发活动的作用。C57BL/6J小鼠侧脑室给予KOR激动剂U50488，30min后腹腔给予KET，测试30min内小鼠的自发活动。 DOR在氯胺酮成瘾机制中的作用： DOR拮抗剂抗氯胺酮诱导的高自发活动的作用。C57BL/6J小鼠腹腔给予DOR拮抗剂Naltrindole，30min后腹腔给予KET，测试30min内小鼠的自发活动。为了验证Naltrindole是否影响小鼠的运动活动，小鼠腹腔给予Naltrindole，测试30min内小鼠的自发活动。 NOPR在氯胺酮成瘾机制中的作用： NOPR拮抗剂抗氯胺酮诱导的高自发活动的作用。C57BL/6J小鼠腹腔给予NOPR拮抗剂J113397，30min后腹腔给予KET，测试30min内小鼠的自发活动。为了验证J113397是否影响小鼠的运动活动，小鼠腹腔给予J113397，测试30min内小鼠的自发活动。 研究结果： （1）噻吩诺啡对氯胺酮成瘾形成的作用 噻吩诺啡抗氯胺酮精神依赖的形成： ①Thien（0.2~5mg/kg,s.c.）能够抑制KET诱导的高自发活动，Thien（0.008~0.2mg/kg,s.c.）单次给药对小鼠的自发活动无显著影响。 ②Thien（0.04mg/kg,s.c.）能够抑制KET诱导的行为敏化的形成，Thien（0.008~0.2mg/kg,s.c.）多次给药不会诱导小鼠行为敏化的形成。 噻吩诺啡抗氯胺酮躯体依赖形成： ①在急性躯体戒断实验中，Thien（0.04、0.2mg/kg,s.c.）能够抑制KET产生的舔足、抓腮、挠耳的戒断症状。 ②在慢性躯体戒断实验中，Thien（0.04、0.2mg/kg,s.c.）能够抑制KET产生的舔足、抓腮、挠耳、梳毛的戒断症状。 （2）噻吩诺啡对氯胺酮成瘾重建的作用 ①Thien（0.04、0.2mg/kg,s.c.）不影响KET诱导的行为敏化的转化。 ②Thien（0.2mg/kg,s.c.）能够抑制KET诱导的行为敏化的表达。 （3）阿片受体在氯胺酮成瘾机制中的作用 ①MOR敲除不影响KET诱导的高自发活动和行为敏化的形成。 ②KOR拮抗剂nor-BNI（50mg/kg,i.p.）能够抑制KET诱导的高自发活动且不影响小鼠的运动活动。KOR激动剂U50488（20~100μg/5μL,i.c.v.）不影响KET诱导的高自发活动。 ③DOR拮抗剂Naltrindole（1~25mg/kg,i.p.）不影响KET诱导的高自发活动，且Naltrindole本身不影响小鼠的运动活动。 ④NOPR拮抗剂J113397（1~25mg/kg,i.p.）不影响KET诱导的高自发活动，且J113397本身不影响小鼠的运动活动。 结论： （1）噻吩诺啡能够抑制氯胺酮诱导的急慢性躯体戒断症状；噻吩诺啡不影响小鼠自发活动，但能够抑制氯胺酮诱导的高自发活动；噻吩诺啡不会诱导行为敏化的形成，但能够抑制氯胺酮诱导的行为敏化的形成和表达，这些结果表明噻吩诺啡对氯胺酮的成瘾有一定的干预作用。 （2）氯胺酮的成瘾可能与KOR有关，与MOR、DOR、NOPR无关。 创新点： （1）发现噻吩诺啡有对抗氯胺酮成瘾的作用 （2）发现氯胺酮成瘾机制可能和KOR有关。
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