摘要
目的:创伤修复是从古至今医学研究的热点问题,白芨为我国传统中药材,其药用历史悠久,资源分布广泛。现代药理研究表明,白芨多糖具有促进创面愈合的作用,但其具体的作用机制尚未阐明。本研究旨在验证白芨多糖在创伤修复中的作用,探索白芨多糖促进创面修复的作用机制,为白芨多糖应用于临床创伤修复提供科学理论基础。 材料和方法:采用CCK-8实验测定白芨多糖干预成纤维细胞后细胞增殖活性的影响。采用细胞划痕实验、Transwell迁移实验测定不同浓度白芨多糖干预成纤维细胞后迁移的影响。采用Westernblot测定不同浓度白芨多糖干预成纤维细胞后EGFR、CollagenⅠ、α-SMA及TGF-β1的表达水平。选取SPF级SD大鼠,建立创伤大鼠模型,分别给予去离水、红霉素软膏、重组人表皮生长因子凝胶、三种浓度的白芨多糖(25mg/ml、50mg/ml、250mg/ml)处理创面。术后观察创面变化情况,分别取创伤后第7天及第14天创面及其创周皮肤行苏木精-伊红(HE)染色及免疫组化染色,测量各组表皮厚度、真皮厚度,以及检测创面中EGF、CollagenⅠ、α-SMA及TGF-β1的表达情况。 结果: (1)CCK-8结果显示,在0.05~5mg/ml的白芨多糖无细胞毒性,且0.5mg/ml、1mg/ml及5mg/ml的细胞存活率显著高于空白组。 (2)Transwell及细胞划痕实验结果表明,1mg/ml的白芨多糖能促进成纤维细胞的迁移。 (3)Westernblot结果显示,1mg/ml的白芨多糖作用成纤维细胞72小时后能增加EGFR的表达量。 (4)大鼠创伤模型显示,三种浓度的白芨多糖组真皮厚度、创面中EGF、CollagenⅠ、α-SMA及TGF-β1的阳性分数均高于空白组,且与重组人表皮生长因子凝胶组作用效果相似,其中红霉素软膏不具有促进创面修复的作用。 结论: (1)在体外实验中,验证了白芨多糖可以促进体外伤口的修复,且通过增加EGFR的表达来促进成纤维细胞的迁移。 (2)在活体动物实验中,白芨多糖可以促进大鼠创面组织中EGF、CollagenⅠ、α-SMA及TGF-β1的分泌,来促进创面组织中细胞的增殖分化与迁移、增加Ⅰ型胶原的合成与分泌、促进肉芽组织的形成、使真皮得以再生重建,从而达到促进大鼠皮肤创面愈合的作用。