摘要
口腔白斑病（OralLeukoplakia，OLK）是一种发生于口腔黏膜上以白色损害为主的、病因未明的的口腔潜在恶性疾患(Oralpotentiallymalignantdisorders,OPMD)。烟草与酒精是OLK的重要病因。此外，包括念珠菌和人乳头瘤病毒等感染因素在OLK发病中的作用也得到证实。随着微生物组学技术的发展，已有研究关注口腔微生物与口腔白斑病发病的相关性，结果提示口腔白斑病患者与健康对照者的口腔菌群存在差异，但是鉴于研究设计的异质性和样本量的限制，目前尚缺乏一致性的结论。另一方面，细菌在口腔鳞状细胞癌（Oralsquamouscellcarcinoma，OSCC）发生中的重要作用已被证实；鉴于OLK属于OPMD，且OLK是口腔鳞状细胞癌的重要来源，提示细菌在OLK发展特别是恶变过程中可能发挥重要作用。目前为止，尚无口腔细菌与口腔白斑病恶性进展的相关性研究。综上，基于现有的口腔白斑病与口腔细菌的研究以及口腔细菌在OSCC中的作用研究，我们推测口腔微生物在OLK的发生发展中可能发挥重要作用。 研究目的： 研究口腔白斑病的唾液菌群的组成和结构特征，结合其功能信息，探索口腔微生物群在口腔白斑病发生发展中的作用，为口腔白斑病病因机制研究提供参考。 研究方法： 本研究采集12名健康对照者和12名口腔白斑病患者的非刺激性唾液样本，通过在IlluminaMiSeq平台进行16SrRNA基因V3-V4区域高通量测序，统计分析口腔白斑病患者唾液菌群的特征，以寻找与口腔白斑病发生相关的关键菌群；同时根据异常增生程度的差异，将9例口腔白斑病不伴或伴轻度异常增生者归为低风险组，3例口腔白斑病伴中重度异常增生者归为高风险组，探索口腔菌群与口腔白斑病发展的关系。 研究结果： 1.口腔白斑病患者与健康对照者的唾液菌群在物种丰富度和多样性上无显著差异。口腔白斑病患者和健康对照者的群落结构不同，其中健康对照组的样本聚集性（相似性）较高，而口腔白斑病组的样本较为离散（异质性高）。物种相关关系分析发现，口腔白斑病患者的唾液微生物相互作用网络明显较健康对照组复杂。 2.口腔白斑病组与健康对照组的唾液菌群组成分析表明，在门水平上，两组均以厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门、变形菌门、以及梭杆菌门为优势菌群；属水平上，均以链球菌属、卟啉单胞菌属、普雷沃菌属、罗氏菌属、颗粒链菌属、奈瑟菌属、嗜血杆菌属、韦荣菌属、孪生球菌属、纤毛菌属、放线菌属、梭杆菌属、二氧化碳噬纤维菌属为优势菌群（丰度＞1%）。值得注意的是，本研究发现伯克氏菌属、苯基菌属仅存在于口腔白斑病患者中。 3.口腔白斑病组与健康对照组相比较，唾液菌群组成差异分析发现：门水平上，口腔白斑病组唾液菌群中放线菌门的相对丰度高于健康对照组，而拟杆菌门和梭杆菌门的相对丰度低于健康对照组近50%，差异均具有统计学意义；属水平上，口腔白斑病组的纤毛菌属、乳酸菌属（Lachnoanaerobaculum）、Sneathia、拟普雷沃菌属的丰度显著较低，差异具有统计学意义。另外口腔白斑病组的普雷沃菌属和卟啉单胞菌属的丰度明显较低，但差异无统计学意义。 4.低风险口腔白斑病组和高风险口腔白斑病组相比较，唾液菌群组成差异分析发现：门水平上，高风险OLK组的放线菌门丰度显著低于低风险OLK组组，差异具有统计学意义；属水平上，高风险OLK组的罗氏菌、孪生球菌、放线菌属、奇异菌属、Butyrivibrio、Solobacterium丰度显著低于低风险OLK组，差异具有统计学意义。另外，高风险OLK组的伯克氏菌属、苯基菌属的丰度明显高于低风险OLK组，而普雷沃菌属、颗粒链菌属、韦荣菌属、纤毛菌属的相对丰度明显低于低风险OLK组，尽管这些差异无统计学意义。 5.基于COG数据库进行唾液菌群功能信息的相对丰度差异分析发现，口腔白斑病患者的唾液菌群较健康对照者，具有较强的基础代谢功能、较弱的细胞膜发生功能；但低风险OLK组的唾液菌群与高风险OLK组之间未见功能信息丰度的显著差异。 6.基于KEGG二级代谢通路的相对丰度差异分析发现，口腔白斑病患者的唾液菌群较健康对照者具有较强的基础代谢功能、较弱的遗传信息处理功能；但低风险OLK组的唾液菌群较高风险OLK组未见显著差异的代谢功能信息。 研究结论： 本研究发现（1）口腔白斑病患者和健康对照者的唾液菌群群落结构不同，健康对照组的样本菌群结构相似性较高，而口腔白斑病组的样本菌群结构较为异质性较高，且口腔白斑病患者的口腔微生物相互作用网络明显较为复杂；（2）口腔白斑病组和健康对照者相比较发现放线菌门、拟杆菌门、梭杆菌门、纤毛菌属和拟普雷沃菌属的丰度变化以及口腔白斑病组单独存在的伯克氏菌属和苯基菌属可能与口腔白斑病的发生相关；低风险OLK组、高风险OLK组的唾液菌群比较结果提示放线菌门、罗氏菌属、孪生球菌属、放线菌属的丰度变化可能与口腔白斑病的进展相关；（3）口腔白斑病患者的唾液菌群功能发生紊乱，菌群基础代谢功能的相对活跃和遗传物质处理能力、膜发生相关功能的相对滞后可能是影响疾病发生发展的危险因素。
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