摘要
皮肌炎（DM）最常见的并发症为间质性肺病（ILD），严重影响患者预后。课题组前期研究发现中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的异常调控参与DM的发病机制，NETs可以通过TLR9-Smad-2-miR7通路激活肺纤维母细胞（LF），可能是引发或加重ILD的因素之一。同时，研究发现NETs还可以诱导内皮细胞发生内皮间质转化（EndoMT）。这些研究提示大部分DM相关ILD，尤其是伴有快速进展型ILD（RP-ILD）的抗MDA5抗体阳性DM可能有肺内皮细胞的损伤，然而，其中的相关机制仍不清楚。 目的：为了探索NETs在DM相关ILD中的作用及可能机制，为本病的发生提供新的见解，为DM相关ILD的治疗提供潜在靶点。 方法：测定DM患者血浆NETs标记物、内皮损伤标记物和抗MDA5抗体浓度并进行相关性分析，观察不同人群的血浆在体外诱发NETs形成能力，用体外分离提取的NETs刺激永生化的HPMECs（HPMEC-ST），CCK8检测细胞活力，WB和免疫荧光检测EndoMT标记物，转录组测序检测差异基因，测序结果进行WB和qPCR验证，最后用实验性自身免疫性肌炎（EAM）小鼠ILD模型进行病理验证。 结果：NETs在DM合并ILD患者体内异常形成，并发生内皮损伤，抗MDA5抗体滴度与血管性假血友病因子（vWF）水平、游离DNA（cfDNA）浓度呈现显著的正相关关系，抗MDA5抗体阳性患者血浆可在体外诱发形成NETs，WB、免疫荧光实验证明NETs能诱导HPMEC-ST发生EndoMT，转录组测序提示肺纤维化相关基因高表达，同时NLRP3、AIM2、IL-1β、TGF-β等基因表达也明显增高，与q-PCR和WB验证结果一致。在EAM小鼠ILD模型肺组织中也发现了NETs的浸润和EndoMT的发生。 结论：在DM合并ILD中，NETs可以通过激活NLRP3炎性小体从而促进EndoMT的发生。因此，抑制NETs形成和阻断NETs激活NLRP3炎性小体可能成为DM合并ILD潜在治疗靶点。
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