摘要
乳酸菌作为益生菌类，能够有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等有害菌的生长，并且还能有效抑制镰刀菌、曲霉等有害真菌的正常生长，因此乳酸菌可作为抗生素的替代品，在畜牧行业中被广泛应用。同时因乳酸菌的代谢产物种含有丰富的有机酸、细菌素、短链脂肪酸及蛋白大分子等物质，具有丰富的营养价值，所以乳酸菌也被广泛应用于饲料及食品工业。乳酸菌能够有效提高食品及饲料的营养价值，提高机体抗病能力，平衡肠道内环境，促进生长发育。故本实验以发酵产品为原料，筛选产酸效果好的乳酸菌，探究其能否经过胃酸的作用顺利到达肠道内定植，同时探究其作为发酵菌剂对饲料营养的影响。 本实验从不同发酵产品中筛选得到的8株乳酸菌（南极乳杆菌BC1、黑龙江乳酸杆菌BC5、戊糖乳杆菌BP1、植物乳杆菌亚种DB1、粪肠球菌DB3、嗜热乳杆菌RF2、嗜酸乳杆菌RF3、鼠李糖乳杆菌SN）。实验室现有乳酸菌（植物乳杆菌NJ、副干酪乳杆菌G1、弯曲乳杆菌G2）。对11株乳酸菌进行产酸初步测定，得到4株产酸效果好的乳酸菌BC1菌株、BP1菌株、NJ菌株、SN菌株。 对乳酸菌进行酸耐受性测定发现，4株乳酸菌在pH 2.5条件下作用2 hrs时活菌存活率均为95%左右，作用4 hrs后4株乳酸菌活菌存活率均在90%以上。4株乳酸菌在pH 1.5条件下作用2 hrs后BC1菌株存活率为10%左右，BP1菌株的存活率为25%左右，NJ菌株、SN菌株的存活率为40%左右。在pH 1.5条件下作用4 hrs后NJ菌株的存活率为10%左右，SN菌株的存活率为20%左右。由于猪胃酸在pH 2-3的范围内波动，且胃排空时间为2-3 hrs左右，所以乳酸菌可顺利通过胃到达肠道内表面。对乳酸菌进行胆盐耐受性测定发现，当胆盐浓度为0.1%时，培养72 hrs后BC1菌株、BP1菌株、NJ菌株OD600为2.2，SN菌株OD600为1.3。当胆盐浓度为0.2%时，培养72 hrs后BC1菌株、BP1菌株、NJ菌株OD600为0.6，SN菌株OD600为0.2。当胆盐浓度为0.3%时，培养72 hrs后BP1菌株OD600为0.6，BC1菌株、NJ菌株OD600为0.3，SN菌株OD600为0.2。因为动物肠道内胆盐的波动范围在0-0.3%之间，随着胆盐浓度的升高乳酸菌生长越缓慢，在高胆盐浓度下，4株乳酸菌仍具有一定的生长能力，所以都可以在肠道内定植。 在前期筛选乳酸菌结果的基础上，筛选得到复合发酵菌剂：植物乳杆菌、戊糖乳 杆菌、弯曲乳杆菌、鼠李糖乳酸杆菌与辅助菌酵母菌、枯草芽孢杆菌。乳酸菌与辅助菌配比为3:1:1。在复合发酵菌剂初步应用中，发酵3、6、9天饲料的粗蛋白相较于原料分别增多了13.49%、20.03%、24.84%，酸溶蛋白相较于原料分别增多了36.33%、44.73%、66.71%。工厂菌剂发酵3、6、9天饲料的粗蛋白相较于原料分别增多了14.71%、15.49%、17.85%，酸溶蛋白相较于原料分别增多了 24.71%、36.76%、47.27%。实验室所筛得的复合发酵菌剂在饲料发酵中，能获得更好的粗蛋白及酸溶蛋白含量。 本实验通过对不同材料的筛选，得到了不同功能的乳酸菌。对饲料发酵复合菌剂的筛选，得到了具有初步应用价值的复合微生物制剂组合。本实验结果对饲料行业具有一定的技术参数支持。
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