摘要
目的:本试验旨在确定锦灯笼提取物对大鼠急性肝损伤的预防作用，并探讨其可能的作用机制。 方法:试验选取75只雌性SD大鼠，随机分为5组:空白对照组（CON）、模型对照组（MOD）、锦灯笼提取物低剂量组（EPCF-L）、锦灯笼提取物中剂量组（EPCF-M）和锦灯笼提取物高剂量组（EPCF-H）,每组15只。试验开始后，EPCF-L、EPCF-M和EPCF-H分别灌胃给予25、50、100 mg/kg的锦灯笼提取物，CON和MOD组灌胃等量蒸馏水，连续5天。最后一次给药结束30 min后，MOD、EPCF-L、EPCF-M和EPCF-H组大鼠灌胃给予硫代乙酰胺（100 mg/kg）,同时腹腔注射50 ％ CCl4橄榄油溶液（1 mL/kg）及LPS溶液（2.5 mg/kg）,CON组大鼠以生理盐水进行同样操作，期间观察大鼠精神状态。于造模后12h、24h、48 h每组随机挑选5只大鼠眼球采血后处死，处死前称量大鼠体重，解剖后称量大鼠肝脏组织，计算各组大鼠的肝脏指数;固定每只大鼠肝脏组织的同一位置，石蜡切片HE染色后观察肝脏的病理变化;生化试剂盒测定大鼠血清、肝脏组织中抗氧化指标;qRT-PCR技术检测大鼠肝脏组织中TLR4、MyD88、NF-κBp65、IκBα及相关炎性因子IL-6、IL-1βmRNA的相对表达量;Western Blot技术检测肝脏组织中 TLR4、MyD88、NF-κB p65、IκBα的蛋白表达水平。 结果:1.与CON组相比，造模组大鼠出现精神沉郁、被毛逆立、身体战栗蜷缩的情况，对外界的刺激反应降低。与CON组相比，MOD组肝脏指数明显上升（P＜0.05）。EPCF-H预处理的大鼠肝脏指数均有所下降。 2.与CON组相比，MOD组大鼠血清中ALT、AST、MDA显著升高（P＜0.05）,T-SOD、GSH-Px显著降低（P＜0.05）。与MOD组相比，EPCF-M、EPCF-H组大鼠血清中ALT、AST、MDA呈下降趋势，T-SOD、GSH-Px均呈上升趋势。 3.与CON组相比，MOD组大鼠肝脏组织中T-SOD、GSH显著降低（P＜0.05）,MDA显著升高（P＜0.05）。与MOD组相比，EPCF组大鼠肝脏组织中T-SOD、GSH均呈上升趋势，MDA呈下降趋势。 4.与CON组相比，MOD组大鼠肝脏组织病变严重，出现大量空泡、气球样变，肝细胞排列紊乱，肝索消失，有炎性细胞浸润。经EPCF预处理的大鼠肝脏组织情况明显好转，其中EPCF-H组改善效果最明显。 5.与CON组相比，MOD组大鼠肝脏组织TLR4、MyD88、NF-κBp65、IL-6和IL-1βmRNA的相对表达量明显升高（P＜0.05）,IκBα的相对表达量明显下降（P＜0.05）。与MOD 组相比，EPCF 组大鼠肝脏组织中 TLR4、MyD88、NF-κB p65、IL-6 和 IL-1β mRNA的相对表达量均呈下降趋势，IκBα的表达量均呈上升趋势。 6.与CON组相比，MOD组大鼠肝脏中TLR4、MyD88、NF-κB p65的蛋白表达量显著升高(P＜0.05）,IκBα的蛋白表达量显著降低（P＜0.05）。与MOD组相比，EPCF-M、EPCF-H组大鼠肝脏组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65的蛋白表达量均显著降低（P＜0.05）,EPCF-H组大鼠肝脏组织中IκBα的蛋白表达量均显著升高（P＜0.05）。 结论:100 mg/kg的锦灯笼提取物可有效缓解机体氧化应激，并通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB p65通路的活性来减少机体炎性因子的产生和释放，减缓大鼠的急性肝损伤。
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