摘要
白及（Bletilla striata（Thunb.） Reichb.f.）为兰科白及属多年生草本植物，是一种集药、饮、保健、园艺兼用的高附加值特种经济植物。种苗费用占白及生产成本的 60%以上，是制约白及产业发展的重要因素。组培快繁是高效、优质、低成本生产白及种苗的有效途径。为缩短育苗周期和培养大球茎组培苗，提高白及驯化苗耐热性。本文开展了贵州优质白及“贵芨1号”的培养基类型、添加物和激素配比对白及组培苗萌发和球茎生长的影响以及钙素提高白及驯化苗的耐热性的研究。获得的主要结果如下： 1. 得到了适合“贵芨1号”种子萌发的培养基1/2MS+0.5mg/LNAA+2g/L蛋白胨+20g/L蔗糖+7g/L琼脂，其在20d时，叶和茎的形态已经形成，并且在萌发60d后平均株高可达3.9cm。 2. 以种子萌发得到的组培苗为材料，经优化得到促进白及大球茎生长最优培养基为 1/2MCa+1.0mg/L6-BA+0.3mg/LNAA+40g/L香蕉+30g/L蔗糖+0.1%活性炭+7g/L琼脂，在转接60d后球茎的平均粒径可达9.8mm。 3. 将本研究优化得到的组培苗与传统生产体系的组培苗进行对比，发现优化苗在 60d时，苗壮硕，并且基底部出现膨大，而传统苗并没有出现，随后将两种苗接种到同一种培养基当时，发现传统苗会缓慢死亡而后侧芽重新生长，而优化苗不会死亡而是继续生长。于是提出了白及组培苗阶段的两种生长模式，使组培生长时长由10个月缩短至4个月，使白及种苗的生产成本降低51.9%。 4. 以白及驯化苗为材料，对其进行温度（25、30、35、40℃）处理，结果显示35℃时，白及的光合作用即会受到抑制，40℃时，白及的光合作用被严重抑制，与 25℃相比净光合速率降低47%，并且对PSⅡ造成严重损伤。通过模拟夏季波动光，发现与25℃处理叶片相比，30、35和40℃叶片在动态光下的碳同化分别下降了55%、71%和85%。 5. 根据高温实验的结果，通过外源施加钙的方式，提高白及驯化苗的耐热性。研究发现，外源钙可以增加叶片单位叶面积的气孔数目，保护类囊体结构，提高光能转化效率，减缓热胁迫下叶绿素降解，SOD、POD、CAT 活性增强，转录组数据表明差异基因富集在氧化磷酸化、次生代谢产物和植物-病原菌互作等通路；而 TFP（钙离子通道抑制剂）加重了类囊体结构的破坏，光能转换效率降低，热耗散系统受损，热应激保护物质含量降低。说明外源钙可以减少夏季高温造成的死苗、小苗和徒长苗等问题，增强驯化苗的耐热性。
NETL