摘要
红花绿绒蒿（Meconopsis punicea Maxim. Fl. Tangu）为属罂粟科绿绒蒿属植物，为西藏常用藏药，其藏药名为“吾白玛布”，是多年生草本植物，藏医古籍《晶珠本草》中记载其性凉，味甘涩，具有清热利尿、消炎止痛、清肝热、肺热等功效，属“欧贝类”。藏医药典籍《四部医典》、《晶珠本草》、《藏药志》等著作都对其有详细的记载，且延用至今。 本课题对藏药红花绿绒蒿全草进行了系统性分离，从红花绿绒蒿全草中分离得到3个脂肪烃类化合物：Heptadecan-8-ol（1），二十三烷醇（2），Tridecyl docosanoate（3），2个其他类化合物：间羟基甲酸（4），β-谷甾醇（5）；4个黄酮类化合物：小麦黄素（6），Hydnocarpin （7），Sinaiticin（8），木犀草素（9）；7个生物碱类化合物：小檗碱（10），阿苞碱（11），Sanguinarin（12），普托品碱（13），N-反式对羟基肉桂酰基-对羟基苯乙胺（14），Epialpinine（15），Alpinigenine（16）在此基础上，对部分化合物进行了HepG2、Hep3B细胞系，HSC-T6细胞系的活性筛选；对有效化合物抑制HepG2、Hep3B细胞增值，促进凋亡的潜在机制进行体外活性研究；对有效化合物抑制HSC-T6细胞的增值，促进凋亡进行体外活性研究。研究包括以下两个部分： 一、抗肝癌作用研究：基于绿绒蒿属植物在传统藏药中治疗热综合症、肝炎、肺炎等的传统用途，对部分分离化学成分进行了抑制HepG2，Hep3B细胞系活性筛选，使用CCK-8法对HepG2，Hep3B细胞进行抗增值活性的筛选，进一步明确了有效化合物对 HepG2， Hep3B 细胞促凋亡活性机制研究。结果显示，小麦黄素（ 6 ）、Hydnocarpin（7）、Sinaiticin（8）、木犀草素（9）、Sanguinarin（12）具有对HepG2、Hep3B细胞增值抑制的作用；进一步研究Hydnocarpin （7）对HepG2、Hep3B细胞系的促凋亡、抑制细胞周期、线粒体膜电位（MMP）、细胞内活性氧（ROS）产生的影响，及探究对相关蛋白（p38，p-p38；ERK，p-ERK）MAPK表达的影响，为后续红花绿绒蒿对肝癌的进一步研究提供了依据。 二、抗肝纤维化的研究：对部分分离化学成分进行了HSC-T6细胞系活性筛选，使用 CCK-8 法对 HSC-T6 进行抗增值活性的筛选，研究有效化合物对 HSC-T6 细胞系的促凋亡活性。结果表明：Hydnocarpin（7），Sinaiticin（8），木犀草素（9），对HSC-T6细胞具有增值抑制作用；进一步研究表明 Hydnocarpin（7），Sinaiticin（8）对HSC-T6细胞具有促进细胞凋亡、抑制细胞周期进程、促进线粒体膜电位（MMP）损伤、降低细胞内活性氧（ROS）产生的活性作用，进一步明确了红花绿绒蒿所含的黄酮木脂素 Hydnocarpin，Sinaiticin对HSC-T6增值抑制的作用效果，为后续红花绿绒蒿对肝纤维化的进一步研究提供了基础依据。 该研究分为“红花绿绒蒿化学成分研究”及“红花绿绒蒿有效成分对肝脏疾病的体外活性研究”两个部分。红花绿绒蒿作为传统藏药具有悠久的使用历史，由于对其化学成分的研究相对缺乏，进一步影响其现代药理学更深入的研究。本课题对红花绿绒蒿化学成分进行分离共得到16个化学成分；在此基础上筛选作用于HepG2、Hep3B细胞系，HSC-T6细胞系的活性物质，进行进一步研究。结果表明黄酮类木脂素大风子素，生物碱类化学成分血根碱对肝癌细胞系具有抑制细胞周期、增加细胞内活性氧、调节线粒体膜电位等作用，并且大风子素能够通过够通过上调p-p38/p38的表达，降低p-ERK1/2/ERK1/2的表达水平起到促进HepG2、Hep3B细胞系凋亡的作用；黄酮类木脂素大风子素、Sinaiticin对HSC-T6细胞系具有促进细胞凋亡、抑制细胞周期、增加细胞内活性氧、调节线粒体膜电位等作用。该研究分离化合物为进一步活性筛选提供了部分物质基础，为后续红花绿绒蒿对肝癌、肝纤维化的进一步研究提供了依据。
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