摘要
蛹虫草（Cordycepsmilitaris）是一种食药用真菌，具较高的营养价值和保健功能，但由于蛹虫草菌种易退化，导致其子实体产量降低、活力下降，成为制约行业发展的关键因素。野生蛹虫草在我国分布广泛，基于各地野生资源，选育高产稳产的蛹虫草菌株，对开发各地特色种质资源和产业发展具有重要意义。本研究立足泰山的地理环境优势，开展野生蛹虫草资源的采集和分类，并进行优良菌株选育，进一步研究了不同浸提方法对优良菌株子实体不同部位（菌核和子座）的活性成分和抗菌抗氧化活性影响，为优良菌株选育及其进一步开发利用奠定基础。主要研究结果如下: 1.泰山野生蛹虫草资源的采集、分类与分离 本研究共采集到野生蛹虫草标本318个，按照寄主种类、子座数量、子座形态、子座着生部位、有无菌索、子囊壳分布以及子囊壳疏密程度将蛹虫草进行形态学分类。采集的蛹虫草共有6种寄主类型;子座数量为1～13根，长9～170mm,宽1～8.5mm;子座大部分为近圆柱状体或扁平状，少部分为顶端分叉、簇状分支和旋转缠绕状;55.98％的菌株有菌索。采用子座分离、孢子分离和菌核分离的方法共成功分离获得154个野生蛹虫草菌株，于马铃薯蛋白胨培养基中4℃保藏备用。 2.野生蛹虫草优良菌株的筛选与驯化栽培 本研究采用菌丝体平板初筛和栽培出草复筛的方式进行优良菌株的筛选。首先剔除无法正常转色以及菌丝生长过慢的菌株;进一步对剩余的菌株进行菌丝体长势评价和评分，初步筛选获得14个菌丝体阶段综合表现较好的菌株;对14个菌株进行栽培出草复筛试验，最后成功筛选获得1个产量较高的优良菌株A16,将该菌株继续驯化栽培2代，其产量较高且较稳定。 3.不同浸提方法对优良菌株子实体不同部位（菌核和子座）的活性成分和抗菌抗氧化活性测定 分别采用热水浸提、冷水浸提和乙醇浸提法对筛选获得的优良菌株A16出草后的不同部位（菌核和子座）进行浸提，对不同浸提液的活性成分及其抗菌抗氧化活性进行了测定，结果表明不同浸提方式和蛹虫草不同部位的活性成分和抗氧化活性均具有显著差异。热水浸提组的多糖含量高于冷水浸提组，其中，多糖含量最高的为A16菌株的子座部分，其在热水浸提液的含量达11.09mg/g,冷水浸提液的含量次之，为8.58mg/g;A16菌核部分的多糖含量最少，在热水和冷水浸提液中分别为2.16mg/g和1.69mg/g。热水浸提组的总多酚含量最高，其中，A16子座的总多酚含量最高，为0.14mg/mL,A16菌核和市售蛹虫草的总多酚含量无显著差异，均为0.13mg/mL左右;冷水浸提组的总多酚含量稍高于乙醇浸提组，含量最低的为市售蛹虫草乙醇浸提液，为0.05mg/mL。乙醇浸提组的总黄酮物质含量最高，其中市售蛹虫草的总黄酮物质含量最高，达到2.23％,最少的为A16蛹虫草子座，仅为1.66％;A16子座和A16菌核的热水和冷水浸提液中的黄酮含量均较低。 抗氧化性总体表现为:水浸提组＞乙醇浸提组;在两组水提液中，抗氧化性表现为:A16子座＞市售蛹虫草＞A16菌核。在乙醇浸提液中，抗氧化性表现为:A16子座＞A16菌核＞市售蛹虫草。抗氧化性与总多酚含量相关性最显著，相关系数为0.75;其次与多糖含量显著相关，相关系数为0.66。 抗菌实验中，乙醇浸提组的抗菌活性优于热水和冷水浸提组，A16子座部分和市售蛹虫草的抗菌活性优于A16菌核部分;A16子座的乙醇浸提液对大肠杆菌的抗菌效果较金黄色葡萄球菌更好，对大肠杆菌的抑菌环直径达14.33mm,对金黄色葡萄球菌的抑菌环直径为10.52mm;A16菌核浸提液的抗菌效果较差。
NETL