摘要
哺乳动物排卵后，如果不能及时受精，卵母细胞将随时间的推移发生老化，已经证明卵母细胞老化后质量会受到影响，从而影响受精后的胚胎质量以及后代的健康状况。绵羊作为一种重要的家畜，具有广泛的农业应用，研究绵羊卵母细胞的老化机制对于绵羊的生殖健康具有重要意义。山羊、猪以及小鼠的卵丘细胞(Cumuluscells,CCs)能够促进卵母细胞成熟，但在卵母细胞老化过程中可以加速其老化，具体机制还不清楚。 肿瘤坏死因子α(Tumornecrosisfactor-α,TNF-α)作为肿瘤坏死因子(Tumornecrosisfactor,TNF)家族的重要一员，它可以通过与其受体(Tumornecrosisfactorreceptor,TNFR)结合诱导细胞凋亡。研究表明，TNF/TNFR系统在大鼠、小鼠、猪以及牛等多个物种的卵巢中活跃表达，TNF-α会损伤牛卵母细胞成熟，导致胚胎发育受损。本试验室之前研究证明小鼠卵母细胞老化过程中凋亡的卵丘细胞分泌TNF-α促进卵母细胞老化。 本研究以绵羊卵母细胞发育能力、激活敏感性、退化率为老化指标，首先通过卵丘卵母细胞复合体(COCs)老化与裸卵(Denudedoocytes,DOs)老化对比，观察卵丘细胞在卵母细胞老化期间发挥的作用，其次通过检测TNF-α在卵丘细胞上的表达，肿瘤坏死因子受体1(Tumornecrosisfactorreceptor1,TNFR1)在卵母细胞上的表达，明确绵羊卵母细胞老化期间TNF-α的作用机制。研究结果如下: (1)绵羊COCs体外老化12h后发育能力下降、激活敏感性增加、退化率提高,COCs体外老化24h后差异更加显著。 (2)绵羊卵母细胞老化期间卵丘细胞可以促进卵母细胞老化，导致COCs体外老化24h后与DOs体外老化24h相比发育能力更差、激活敏感性更高、退化率更高,COCs体外老化12h与DOs体外老化12h相比差异更加显著。 (3)绵羊卵丘细胞随体外培养时间的延长凋亡水平逐渐升高。 (4)绵羊卵母细胞表达TNFR1,且老化后表达下降，卵丘细胞表达TNF-α,且表达水平随卵丘细胞凋亡水平的升高而提高。
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