摘要
肝脏疾病在动物生产和宠物饲养中是一个常见的问题，对动物健康和生产能力有着重要的影响;同时慢性肝病是困扰全球人类健康的主要问题之一，全球约有8亿人受到影响，每年导致约200万人死亡。在众多慢性肝病中，纤维化是疾病进展的共同病理途径和重要特征，但到目前为止尚无官方批准的特效药物。肝星状细胞(Hepaticstellatecells,HSC)是肌成纤维细胞的祖细胞，在肝纤维化进程中起关键作用，抑制星状细胞的活化是肝纤维化治疗中的一种重要方法，而Hippo/YAP信号通路在激活肝星状细胞中发挥重要作用，可以作为抑制肝星状细胞活化的重要靶点。牛磺鹅去氧胆酸(TaurochenodeoxycholicAcid,TCDCA)是一种结合型胆汁酸，在肝脏中由牛磺酸和鹅去氧胆酸合成，是动物胆汁的一种主要生物活性物质，在解热、镇痛、祛痰、抑菌和免疫调节等方面有一定作用，但其对治疗肝纤维化的效果目前仅有少量报道，且其分子机制并不明确。 为了探究牛磺鹅去氧胆酸对肝纤维化的影响及其分子机制，我们采用胆道闭锁(Extrahepaticbiliaryatresia,EHBA)诱导大鼠肝纤维化模型和CCl4诱导小鼠肝纤维化模型，揭示了牛磺鹅去氧胆酸对肝纤维化的治疗效果，并阐明了牛磺鹅去氧胆酸通过调控Hippo/YAP通路抑制肝星状细胞激活来减轻肝脏纤维化,主要结果如下: 1.TCDCA缓解大鼠及小鼠的肝纤维化 通过胆道闭锁手术构建大鼠肝纤维化模型和CCl4腹腔注射构建小鼠肝纤维化模型，给予治疗组灌胃TCDCA,结果显示，与损伤组相比，治疗组在Masson染色和免疫组化α-SMA染色中的阳性信号减少、肝脏组织中羟脯氨酸含量降低、纤维化标志基因表达量下调，结果表明TCDCA缓解了两种动物模型中肝脏的纤维化。 2.TCDCA抑制肝纤维化过程中YAP及其下游靶基因的表达 肝脏组织转录组测序结果显示治疗组和损伤组中Hippo/YAP通路相关基因变化较大，qRT-PCR和WesternBlot检测结果显示损伤组Hippo通路核心激酶Mst1被抑制，YAP及其下游靶基因的表达显著上升;而治疗组激活了Hippo通路，并抑制了YAP及其下游靶基因的表达。以上结果说明TCDCA通过激活Hippo通路从而抑制YAP及其下游靶基因的表达。 3.YAP表达的下调抑制肝星状细胞的激活 为了进一步探究YAP表达量变化与肝星状细胞活化之间的关系，我们对各组大鼠肝脏切片进行了免疫荧光和免疫组化检测。免疫荧光结果显示，在损伤组肝脏中有大量的肝星状细胞活化，且蔓延至中央静脉周围，而灌胃TCDCA后减少了肝星状细胞的活化，并阻止其从门静脉向中央静脉蔓延。免疫组化结果显示损伤组α-SMA和YAP有较多的共定位;而灌胃TCDCA后仅有少量的α-SMA和YAP的阳性信号，且几乎没有共定位。研究结果表明损伤组肝星状细胞中的YAP表达增加并促进其分化为成纤维细胞，进而导致了严重的肝纤维化;而灌胃TCDCA抑制了肝脏中YAP过度表达，减少了肝星状细胞的活化，从而减轻了肝纤维化程度。
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