摘要
目的(1)为了收集和传承邓阿黎教授的临床用药经验及学术思想，本研究旨在利用古今医案云平台软件，结合数据挖掘技术，深入分析邓阿黎教授治疗多囊卵巢综合征(PolycysticOvarySyndromer,PCOS)的病历，以期更好地理解多囊卵巢综合征病因、病机、临床分型以及处方用药特点，从而为中医药治疗多囊卵巢综合征提供有力的依据、数据支撑和机制探索。 (2)运用网络药理学方法和技术，研究邓阿黎教授处方用药中的核心药对“当归-菟丝子-白术”治疗多囊卵巢综合征的主要活性成分、基因作用靶点、通路等药理学作用机制。 方法(1)收集2020年10月至2023年1月在湖北省中医院光谷院区妇科门诊就诊，经诊断为多囊卵巢综合征的患者病历资料，制定纳入标准与排除标准。筛选出符合纳入标准的患者共81例，采集到有中药治疗的就诊病历116诊次，处方共116首。对所采集的病历资料进行规范的标准化处理后，建立Excel数据表，导入古今医案云平台(V2.1)软件对多囊卵巢综合征患者的一般情况、病因病机、中医证型、中药等信息进行频数、关联规则及聚类分析等数据挖掘。 (2)通过数据挖掘获得PCOS核心药对“当归-菟丝子-白术”;检索中药系统药理学分析平台(TCMSP)筛选出当归、菟丝子和白术的有效活性成分和候选靶点;查询GeneCards、OMIM、DrugBank及Disgenet数据库获得PCOS疾病靶点，找到药物和疾病的共同靶点;运用David数据库及String数据库对共同靶点进行基因功能GO富集分析和KEGG富集分析;采用Cytoscape软件构建成分-靶点-通路网络。 结果(1)经过统计分析，一般情况主要对年龄进行分析，诊断为多囊卵巢综合征同时符合纳入标准的患者共81例，年龄分布从16岁到37岁,平均年龄25.72岁。其中，26-30岁患者区间数量最多，为49例，占42.24％。其次为21-25岁，为38例，占32.76％。通过中医病位分布分析，在肾者最多，其次属脾和肝。病性分布中可见虚占比最大，其次为气滞、痰、湿、血瘀。从中医疾病分布见多囊卵巢综合征患者月经后期占大多数，其次为不孕症、月经先期、经间期出血、闭经、月经先后不定期、经期延长。中医证型可分为5类，比例从高到低为肝郁肾虚证、脾虚痰湿证、脾肾阳虚证、肾虚证、肾虚血瘀证。在多囊卵巢综合征的治疗中使用频次较高的中药分别为当归、菟丝子、白术、山药、熟地黄、炙甘草、枸杞子、白芍、黄芪、茯苓等。通过药物归经统计可见，归经最多的是肝、脾、肾三经。结果同多囊卵巢综合征的病位相互对应。通过药物四气统计分析可见，治疗多囊卵巢综合征的中药性味以平性、温性、微寒性为主，通过药物五味统计分析可见药多用性甘、辛、苦者。证候与药物关联分析结果显示，使用较多的关联组合有:肝郁肾虚证-当归、菟丝子;脾虚痰湿证-茯苓、当归、炙甘草、陈皮、白术;脾肾阳虚证-当归、菟丝子;肾虚证-当归、白术;肾虚血瘀证-当归;可见在各种证候关联中都有当归。药物相互关联的分析结果显示，使用较多的关联组合有:当归-菟丝子、菟丝子-当归、白术-当归、炙甘草-当归、白术-菟丝子。观察上述组合，可见当归-菟丝子-白术相互组合重复出现，表明其药对为核心处方。药物聚类分析结果显示，第一组:当归、川芎;第二组:柴胡、白芍、熟地黄、枸杞子;第三组:炙甘草、茯苓、白术、醋香附;第四组:黄芪、太子参、菟丝子、山药、酒萸肉。 (2)网络药理学分析结果:核心药对由当归-菟丝子-白术组成。通过TCMSP平台的OB和DL筛选，发现当归-菟丝子-白术含有19种有效活性成分,其中靶点最多的4种依次为槲皮素(quercetin)、山萘酚(kaempferol)、异鼠李素(isorhamnetin)、14-乙酰基各里光酰基-8-反式白术三醇(14-acetyl-12-senecioyl-2E,8Z,108E-atractylentriol)。经过数据库筛选，发现当归-菟丝子-白术关键有效的靶点基因317个，疾病靶点2712个，利用韦恩2.1.0软件获得药物活性成分治疗PCOS的潜在作用靶点及韦恩图。筛选出当归-菟丝子-白术治疗多囊卵巢综合征的潜在作用靶点共145个。利用蛋白相互作用网络及Cytoscape软件，分析出关键靶点有VDR、DAPK1、RET、ROS1、ESR2等，进行GO和KEGG通路富集分析，该核心处方药物可能是通过ERK1和ERK2级联的正向调控(positiveregulationofERK1andERK2cascade)、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正向调控(positiveregulationoftranscriptionfromRNApolymeraseⅡpromoter)、胰岛素受体底物结合(insulinreceptorsubstratebinding)、内分泌抵抗(Endocrineresistance)、EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性(EGFRtyrosinekinaseinhibitorresistance)、类固醇激素生物合成(Steroidhormonebiosynthesis)、FoxO信号通路(FoxOsignalingpathway)、催乳素信号通路(Prolactinsignalingpathway)、黄体酮介导的卵母细胞成熟(Progesterone-mediatedoocytematuration)、Rap1信号通路(Rap1signalingpathway)、PD-L1在癌症中的表达和PD-1检查点通路(PD-L1expressionandPD-1checkpointpathwayincancer)、VEGF信号通路(VEGFsignalingpathway)等信号通路治疗PCOS。 结论(1)通过对邓阿黎教授方药进行数据挖掘分析，多囊卵巢综合征发病机制以肾肝脾功能失调共为本，痰、湿是多囊卵巢综合征的常见致病因素，久病亦可致瘀，属于本虚标实之证。本病中医证型可分为5类，分别为肝郁肾虚证、脾虚痰湿证、脾肾阳虚证、肾虚证、肾虚血瘀证。邓阿黎教授在治疗多囊卵巢综合征时多采用平温、甘辛药物，治疗大法以补肾健脾，燥湿化痰、活血祛瘀为主，佐以疏肝理气，从而达到标本兼顾的效果，方药多选当归-菟丝子-白术组合。 (2)通过数据挖掘获得多囊卵巢综合征核心药对“当归-菟丝子-白术”，此核心药对的有效活性成分可能通过多靶点、多个信号通路作用与疾病，治疗多囊卵巢综合征的主要靶点基因是维生素D3受体(VDR)、死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)、原癌基因酪氨酸蛋白激酶受体Ret(RET)、原癌基因酪氨酸蛋白激酶ROS(ROS1)、雌激素受体β(ESR2)。该核心处方药物治疗PCOS是通过多种信号通路，其主要涉及抗炎、抗癌、调节血脂、类固醇、性激素、促进血管的微循环及改善胰岛素抵抗等多个途径。
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