摘要
目的：（1）明确人肌醇单磷酸酶2（IMPA2）在上皮性卵巢癌中的表达特征；（2）阐明IMPA2对上皮性卵巢癌细胞生物学功能的影响；（3）初步探究IMPA2对上皮性卵巢癌细胞生物学功能的调控机制；方法：（1）基于TCGA、GTEx和CPTAC等数据库分析IMPA2表达及其与临床特征的相关性，利用实时定量PCR（RT-PCR）技术验证4株上皮性卵巢癌细胞株中IMPA2基因表达水平；（2）通过慢病毒干扰构建IMPA2基因低表达的上皮性卵巢癌细胞系，RT-PCR和蛋白印迹技术（WB）检测干扰效率；（3）通过Celigo细胞成像分析技术、MTT增殖检测、细胞克隆形成实验、流式细胞技术和Transwell实验检测IMPA2低表达对细胞的增殖、凋亡、侵袭和转移能力的影响；（4）裸鼠体内成瘤实验验证体外实验结果；（5）利用数据库筛选IMPA2富集的功能和信号通路，同时WB检测IMPA2低表达相关的信号通路蛋白及其磷酸化的表达水平；此外，检测侵袭蛋白、和上皮间质转化（epithelialmesenchymaltransforming，EMT）蛋白的表达水平，并筛选IMPA2可能调控的下游靶标基因；（6）构建IMPA2低表达和下游基因VIM过表达的慢病毒干扰细胞系，利用细胞增殖和Transwell实验检测IMPA2靶向VIM对上皮性卵巢癌细胞的增殖和转移能力的影响。结果：（1）IMPA2在12种肿瘤中低表达和14种肿瘤中高表达，OV中显著高表达，且实验验证了IMPA2在4株上皮性卵巢癌细胞株中均表达；（2）泛癌分析表明IMPA2的高表达与卵巢癌患者临床分期Ⅲ，Ⅳ以及年龄小于59岁相关，IMPA2基因突变和拷贝数变异与OV发生呈显著正相关；同时IMPA2表达与分化簇4（CD4）T细胞呈负相关，IMPA2表达与B细胞和DC细胞呈正相关（P＜0.05）；（3）慢病毒RNA干扰能够显著抑制IMPA2的表达水平，敲低IMPA2能够显著抑制上皮性卵巢癌细胞的增殖和克隆形成能力，同时能够抑制细胞抗凋亡、迁移和侵袭能力（Plt;0.05）；（4）IMPA2低表达抑制卵巢癌细胞裸鼠成瘤形成能力，能够显著抑制瘤体体积和重量（Plt;0.05）；（5）富集结果显示IMPA2在卵巢癌中参与核因子κB（NF-κB）、Wnt和EMT等功能和通路；WB检测结果进一步证明IMPA2低表达可以下调SKOV3细胞中ERK/P38/MAPK、PI3K/AKT/mTOR、Wnt/β-Catenin和NF-κB信号通路中关键蛋白及其磷酸化蛋白的表达，同时IMPA可以调控侵袭蛋白（Twist和MMP9）和EMT蛋白（Slug、Snail、Twist、CDH1、CDH2、FN1和VIM）的表达（Plt;0.05）；（6）上皮性卵巢癌细胞中IMPA2可以靶向调控下游基因VIM，从而调控细胞的增殖和转移。结论：本研究发现在卵巢癌组织和细胞系中IMPA2高表达，当IMPA2低表达时通过靶向VIM抑制上皮性卵巢癌细胞的恶性生物学功能。表明IMPA2参与调控上皮性卵巢癌的发生和转移，为上皮性卵巢癌的个性化治疗提供新的分子靶标基因。
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