摘要
目的：本实验通过建立光老化小鼠模型，予以桃红四物汤进行干预，观察干预前后各组小鼠皮肤组织病理形态学改变，自噬标志物LC3-Ⅱ、Beclin1、P62相关蛋白的表达情况，探讨桃红四物汤对光老化小鼠自噬相关蛋白的影响，为进一步开展临床研究、预防和治疗皮肤光老化奠定基础。 材料与方法：8周龄SPF级昆明小鼠40只，随机分成4组，分别是空白对照组、光老化模型组、桃红四物汤组、VE对照组，每组10只。适应性常规饲养一周后，剔除小鼠背部毛发，除空白组以外皆予以UVA联合UVB紫外线灯照射其背部，照射频率为每周7次，每次2小时，共照射7周，建立光老化小鼠模型。造模成功后模型组予以等剂量生理盐水、桃红四物汤组予以桃红四物汤药液、VE组予以VE溶液经口灌胃干预，每日1次，剂量均为0.4ml/只。给药4周。末次给药后，隔天将小鼠颈椎脱臼处死，取背部皮肤组织用于各试验检测。HE染色观察皮肤形态变化；免疫组化法检测各组小鼠皮肤组织中LC3II，Beclin1蛋白的表达；Western-blot法检测各组小鼠皮肤组织中自噬相关蛋白LC3II，Beclin1，P62的表达水平。 结果： 1.小鼠背部HE染色结果 与空白对照组相比，模型组小鼠表皮层厚度增加，出现分层且界限不清，真皮层纤维组织排序混乱，分布不均，可见炎性浸润。与模型组相比，桃红四物汤组，小鼠皮肤结构较为完整，表皮厚度降低，炎性浸润减少，胶原纤维束断裂减少。VE组真皮层组织排列更为有序，表皮厚度降低，炎性浸润降低。 2.western-blot结果 与空白组相比，模型组小鼠皮肤组织中LC3Ⅱ、beclin-1水平降低，P62水平增加（P＜0.01）；与模型组相比，桃红四物汤组，VE组LC3Ⅱ、beclin-1水平增加，P62水平降低（P＜0.01）；VE组与桃红四物汤组相比较无明显统计学差异。 3.免疫组化结果 与空白组相比，模型组小鼠皮肤LC3-II的表达降低（P＜0.01）、Beclin1表达降低（P＜0.01）；与模型组相比，桃红四物汤组，VE组LC3-II、beclin-1水平增加（P＜0.01）；VE组与桃红四物汤组相比较无明显统计学差异。 结论： 1.紫外线照射可以抑制细胞自噬活性。 2.桃红四物汤能增强细胞自噬，从而抑制紫外线诱导的皮肤损伤老化过程，但其具体机制需要进一步探讨。
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