摘要
研究背景：心血管疾病已在我国主要死亡病因中位居榜首，随着中国人口老龄化和人群代谢危险因素持续增加，心血管疾病的负担必将继续增加。动脉粥样硬化作为诸多心脑血管疾病的主要病理基础，从多个方面研究并挖掘延缓动脉粥样硬化病变进展的潜在靶点具有重要意义。 目的：探讨褪黑素对于动脉粥样硬化病变的作用，并初步探讨褪黑素作用于动脉粥样硬化的具体途径。 方法：随机选择6只WT小鼠作为正常组，将24只ApoE-/-小鼠随机分为4组：AS模型组、AS模型+褪黑素组、AS模型+RSL3组、AS模型+RSL3+褪黑素组。30只小鼠均以高脂饮食饲养4个月。第3个月，给予AS模型+RSL3组、AS模型+RSL3+褪黑素组共12只小鼠每周2次腹腔注射RSL3（100mg/Kg），共4周，其余小组的小鼠给予同等体积的溶剂腹腔注射；第4个月，给予AS模型+褪黑素组、AS模型+RSL3+褪黑素组共12只小鼠每日腹腔注射褪黑素（20mg/Kg）,共30天，其余小组的小鼠给予同等体积的溶剂腹腔注射。30只小鼠共饲养4个月后取小鼠的眼球血用于检测血脂、血清铁水平，解剖小鼠收集胸腹主动脉标本用于检测血管组织中铁死亡水平。1、评估造模是否成功：检测各组小鼠外周血中血脂水平、血管组织中动脉粥样硬化斑块及脂质浸润；2、评估褪黑素治疗对动脉粥样硬化病变有无明显改善作用；检测各组小鼠组织细胞中铁死亡相关指标水平，如血清GSH/GSSG、铁水平，血管组织中SLC7A11、GPX4表达水平。3、评估褪黑素是否通过抑制铁死亡途径来减轻动脉粥样硬化病变；检测各组小鼠血清中GSH/GSSG及血管组织中GPX4、SLC7A11表达水平，初步探讨褪黑素是否通过GSH/SLC7A11/GPX4途径来抑制动脉粥样硬化小鼠体内发生铁死亡。 结果：（1）成功构建动脉粥样硬化模型；（2）各组小鼠之间外周血血脂水平及血清铁水平存在明显差异，褪黑素处理组低密度脂蛋白及甘油三酯浓度显著低于模型组（Plt;0.01）；褪黑素与RSL3共处理组低密度脂蛋白及甘油三酯浓度显著低于RSL3处理组（Plt;0.01）。（3）褪黑素能够降低动脉粥样硬化模型小鼠体内脂质过氧化水平、增加抗氧化能力；褪黑素处理组MDA及LPO水平显著低于模型组，褪黑素与RSL3共处理组MDA及LPO水平显著低于RSL3处理组；褪黑素处理组GSH/GSSG比值显著高于模型组（Plt;0.05），褪黑素与RSL3共处理组GSH/GSSG比值显著高于RSL3处理组（Plt;0.05）；（4）褪黑素可使动脉粥样硬化模型小鼠主动脉血管组织中GPX4、SLC7A11表达水平升高；褪黑素处理组SLC7A11和GPX4的mRNA及蛋白表达水平分别显著高于对照组；褪黑素与RSL3共处理组的SLC7A11和GPX4的mRNA及蛋白表达水平显著高于RSL3处理组。 结论：褪黑素通过降低脂质过氧化水平及提高抗氧化能力从而改善动脉粥样硬化，进一步探讨发现褪黑素通过GSH/SLC7A11/GPX4轴抑制铁死亡而改善动脉粥样硬化。
NETL