摘要
目的：采用三种方法建立气阴两虚型2型糖尿病病证结合大鼠模型，依据临床诊疗标准，全面采集动物模型的宏观体征和微观指标，筛选造模周期短、模型稳定的动物模型，利用代谢组学探讨证候潜在的生物学特征。 方法：通过高糖高脂喂养+注射链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）、高糖高脂喂养+注射STZ+灌服热性中药和自发性GK大鼠长期喂养制备气阴两虚型2型糖尿病病证结合大鼠模型。定期监测大鼠精神状态、体重、进食量、饮水量、抓力、心率、呼吸、脉搏、舌象、旷场，试验结束时检测大鼠脏器指数，血液中胰岛素抵抗指数（IR）、随机血糖、空腹血糖、凝血四项、血脂四项、胰岛素（insulin，INS）、SOD、MDA、cAMP、cGMP、CD4、CD8、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4（adisintegrinandmetalloproteinasewiththrombospondinmotif4，Adamts4）、早期生长反应因子2（Earlygrowthresponse2，Egr2）、胰岛素样生长因子结合蛋白-1（insulin-likegrowthfactorbindingprotein-1，Igfbp1）水平和尿蛋白含量的变化。HE染色观察胰腺、心、肾组织形态学变化，综合评价气阴两虚型2型糖尿病大鼠证候表现，利用代谢组学筛选大鼠尿液中与气阴两虚证相关的差异代谢产物和代谢途径。 结果：（1）三种模型大鼠均出现精神萎靡、消瘦、口干、多食、疲乏无力、气短、脉弱的证候表现。○1高糖高脂+STZ模型大鼠随机血糖、空腹血糖、胰岛素抵抗指数、TC、TG、LDL-C升高、HDL-C无显著性变化、FIB升高、APTT降低、INS降低、MDA升高、SOD无显著性变化、CD4升高、CD8无显著性变化、cAMP无显著性变化、cGMP降低、Adamts4、Egr2、Igfbp1升高，尿蛋白升高。○2高糖高脂+STZ+热性中药模型大鼠随机血糖、空腹血糖、胰岛素抵抗指数升高、TG升高、TC、LDL-C、HDL-C无显著性变化，FIB升高、APTT降低、INS降低、MDA升高、SOD降低、CD4升高、CD8无显著性变化、cAMP无显著性变化、cGMP降低、Adamts4、Egr2、Igfbp1无显著性变化、尿蛋白升高。○3自发性GK大鼠模型随机血糖、空腹血糖、TC、HDL-C升高、TG降低、LDL-C无显著性变化、PT、FIB升高、INS、胰岛素抵抗指数无显著变化、MDA升高、SOD升高、CD4升高、CD8水平降低、cAMP、cGMP无显著性变化、Adamts4、Egr2和Igfbp1无显著性变化、尿蛋白升高。（2）代谢组学结果显示：○1高糖高脂+STZ模型大鼠前20的差异代谢物包括苏氨酸、亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、天冬氨酸等。○2高糖高脂+STZ+热性中药模型大鼠前20的差异代谢物包括3-异丙烯基戊二酸、去甲庚酮、酪氨酸、丝氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、组氨酸等。○3自发性GK模型大鼠前20的差异代谢物包括L-赖氨酸、L-苯丙氨酸、精氨酸、色氨酸、糖内酯、次黄嘌呤等。 结论：（1）三种模型方法均能在宏观体征、糖脂代谢、炎症因子、氧化应激反应等方面发生明显的改变，表现出气阴两虚的证候。但各项指标变化程度不同。自发性高血糖GK大鼠实验周期短，易于并发症，但价格昂贵，成本高，广泛推广不适宜。采用高糖高脂+STZ+热性中药模型造模时间相对较短，所采用的动物为SPF级普通大鼠，成本较低，反映的疾病特征和证候特点与临床吻合度也较高，本研究认为更适合制备气阴两虚型2型糖尿病病证结合动物模型。（2）三种模型动物尿液的代谢组学共同特征显示气阴两虚潜在差异代谢物是色氨酸、谷氨酸、苏氨酸、精氨酸、甘氨酸、卵磷脂、棕榈酸、乳酸、5-羟基丙戊酸，涉及的代谢途径为氨基酸生物合成、脂肪酸生物合成、糖酵解/糖异生、药物代谢-细胞色素P450代谢等。
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