摘要
西兰花属于十字花科植物，含有多种生物活性物质。其中萝卜硫素（SFN）在西兰花种子和芽苗中含量极为丰富，具有抗氧化、抗炎、抗癌和改善肠道微生物结构等多种生理活性。SFN又可以预防非酒精性脂肪肝、糖尿病和肥胖等慢性病的发生。本研究首先从西兰花种子中提取并纯化得到高纯度SFN；其次通过喷施外源海藻糖-6-磷酸（T6P）得到高含量SFN的西兰花芽苗；最后采用仿生胃肠反应器对肥胖患者粪便进行体外发酵，研究SFN对肥胖患者肠道微生物的影响。通过本研究得到以下结论： （1）对提取条件进行单因素试验优化，发现酶解温度和酶解pH值对SFN的提取量影响较为显著。在单因素分析的基础上，进行正交优化试验，得到最佳的提取条件：酶解时间为12h，酶解pH为7，酶解料液比为1:4，酶解温度30℃，此条件下，SFN提取量可达6.71mg/g。通过半制备液相色谱纯化粗提SFN，得到的SFN纯度能够达到95%。最后，利用液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）对SFN纯化物进行鉴定，确认提取物为SFN。 （2）通过测定西兰花芽苗中萝卜硫素的含量，发现海藻糖-6-磷酸（T6P）的最佳喷施浓度为500μM，此时SFN含量提高了91%。500μM的T6P可以显著提高西兰花芽苗的生长指标（株高和鲜重）、总硫代葡萄糖苷含量（GLS）和黑芥子酶酶活，同时能够提高西兰花芽苗中游离氨基酸（蛋氨酸和色氨酸），激素（茉莉酸和茉莉酸-异亮氨酸）、总酚和类黄酮的含量。通过荧光定量PCR分析，发现外源喷施T6P能够显著上调MYB28、SUR1、UGT74B1、CYP79F1、CYP83A1和SOT18等与SFN合成相关的基因表达量。 （3）SFN经唾液，胃液和小肠液模拟消化后没有被降解，表明其能够安全的被输送到结肠。体外发酵表明，SFN可以提高肠道内代谢物短链脂肪酸（SCFAs）的含量，其中丁酸和戊酸的含量分别增加了21%和46%。通过16SrDNA基因测序分析，发现SFN可以增加肠道微生物的多样性。同时SFN可以增加多种肠道有益菌群的丰度，包括魏斯特氏菌（Weissella）、明串珠菌（Leuconostoc）、乳杆菌（Lactobacillus）、另枝杆菌属（Algiphilus）和普拉梭菌属（Faecalibacterium），抑制有害细菌的丰度，如克雷伯氏菌（Klebsiella）、埃希杆菌-志贺菌属（Escherichia-Shigella）、梭状芽胞杆菌属（Clostridium_sensu_stricto_1）、萨特氏菌（Sutterella）、巨假单胞菌（Megamonas）和变形杆菌属（Proteus）。
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