摘要
黏膜粘液乳杆菌（Limosilactobacillusmucosae）具有较好的与肠道上皮细胞结合的能力，有利于其在肠道中的定植，为其发挥益生功能提供了优势。黏膜粘液乳杆菌虽在欧盟已经被允许用于食品工业，但尚未加入我国可用于食品的菌种名单。研究表明，黏膜粘液乳杆菌具有良好的脂代谢调节能力，但不同黏膜粘液乳杆菌调节脂代谢的作用途径仍缺少阐述。非酒精性脂肪肝病（Nonalcoholicfattyliverdisease，NAFLD）正在迅速成为世界上最常见的慢性肝病，在全球范围内的患病率超过25%。肥胖、血脂异常、高血压和糖尿病等代谢类疾病都与NAFLD相关。本文以NAFLD为模型，根据系统发育树，挑选了12株不同来源的黏膜粘液乳杆菌，首先评价不同来源的黏膜粘液乳杆菌对NAFLD的缓解效果，之后对黏膜粘液乳杆菌缓解NAFLD的作用途径进行了探究，最后针对可良好缓解NAFLD的黏膜粘液乳杆菌进行了安全性评价。主要结果如下： 首先，从黏膜粘液乳杆菌的系统发育树出发，选取了12株黏膜粘液乳杆菌进行动物试验。对高脂饮食诱导的小鼠NAFLD模型进行12周的干预后，通过体重、肝脏及脂肪重量和病理切片、葡萄糖耐受和胰岛素耐受、血脂水平等指标，选择出了对于NAFLD具有较好的缓解作用的3株黏膜粘液乳杆菌DCC1HL5、FZJTZ26M3和GD16M9。对于这3株黏膜粘液乳杆菌缓解NAFLD的作用途径的进一步探究表明，3株黏膜粘液乳杆菌均可调节小鼠肠道菌群，增加肠道有益菌如LachnospiraceaeNK4A136group、Akkermansia、Roseburia等的相对丰度，并降低与NAFLD相关的菌属如Lachnoclostridium、Blautia和Christensenellaceae等的相对丰度；通过修复肠道屏障降低血清的内毒素水平并减缓NAFLD小鼠炎症的发生。此外，GD16M9可调节肝脏脂肪分解及脂肪酸β-氧化，DCC1HL5和FZJTZ26M3可恢复NAFLD小鼠的瘦素抵抗，而FZJTZ26M3还可调节白色脂肪组织的脂质代谢和储存以及小鼠脂肪细胞分化。 其次，对缓解NAFLD作用较好的DCC1HL5、FZJTZ26M3和GD16M9进行了安全性评价，包括了表型和基因型、亚急性口服毒性试验以及对免疫低下小鼠的影响。结果表明，3株黏膜粘液乳杆菌不存在具有明确致病性的毒力基因和基因岛；3株菌对于氯霉素具有抗性，DCC1HL5还具有对卡那霉素和四环素的抗性，但抗性基因水平转移的可能性较小。此外，3株黏膜粘液乳杆菌不产生生物胺，没有典型的溶血能力。28d亚急性口服毒性试验的结果表明，109CFU剂量的DCC1HL5、FZJTZ26M3和GD16M9不会造成正常小鼠和免疫低下小鼠的体重、脏器指数和组织结构、血细胞数量及形态分布、空腹血糖和血脂、肝功能指标以及肠道炎症等各个方面的异常。 因此，黏膜粘液乳杆菌DCC1HL5、FZJTZ26M3和GD16M9具有安全应用于缓解NAFLD的功能食品中的潜力。本文丰富了益生菌资源，并为黏膜粘液乳杆菌未来在我国的应用提供了参考。
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