摘要
研究目的 基于中医传承辅助平台（V2.5）和网络药理学对孙冰教授治疗多囊卵巢综合征卵泡期的临床医案数据进行处理和统计分析，总结孙冰教授治疗多囊卵巢综合征卵泡期的用药规律，挖掘核心处方，探索核心处方的潜在机理，传承孙冰教授诊治多囊卵巢综合征的经验。 方法 研究一：提取孙冰教授治疗多囊卵巢综合征患者的门诊病历数据，借助中医传承辅助平台（V2.5）、SPSSModeler18、SPSSStatistics25等软件对患者的四诊资料，临床有效率进行统计，总结药物的性味、归经、应用频次、药对组合，明确核心用药，挖掘核心处方，探索辨治规律。 研究二：利用TCMSP数据库、UniProt数据库收集和筛选核心处方的活性成分和靶点，利用DisGeNET、OMIM、GeneCards数据库检索多囊卵巢综合征的相关基因。将核心处方和疾病的靶点取交集，通过Cytoscape3.9.0软件构建“中药－活性成分－靶点－疾病”网络；将交集靶点导入STRING网站构建PPI网络并利用Cytoscape3.9.0软件分析交集靶点的拓扑参数筛选核心靶点；应用DAVID数据库GO功能富集分析和KEGG通路富集分析并构建“活性成分-靶点-通路”网络。 结果 研究一：共收集处方779首，包括215患者，主要症状包括婚久不孕、月经不调等。根据纳排标准对101患者进行回顾性分析显示孙冰教授治疗多囊卵巢综合征的总有效率为84.16%，且患者治疗的周期越长，有效率越高。将患者按照中药组和中西药联合组进行分组，并根据文献纳入西药组进一步分析显示，中药组的总有效率高于西药组（82.1%VS72%），差异无统计学意义（P＞0.05）。联合组患者的有效率86.7%（39/45）高于纯中药组82.1%（46/56）和纯西药组72%（72/100），差异无统计学意义（P＞0.05）。将中药组与联合组各疗程与纳入文献西药组（72/100）比较，中药组与联合组疗程≥4（χ2=4.082，P=0.043）、≥3（χ2=5.036，P=0.025）、≥2（χ2=5.75，P=0.016）、≥1（χ2=4.344，P=0.037）的有效率高于西药组。根据药物频次、频次划分和功效分类结果所示，处方中用药频次较多的有党参、当归、菟丝子、女贞子、旱莲草、炙甘草、白术、熟地黄等。药物分类以补虚类、活血化瘀类、理气类为主。药性偏温、平，味多甘、苦、辛，归经以肝、脾、肾经为多。药物剂量在6～45g之间，药物模式31种，以菟丝子、党参、当归、旱莲草、女贞子为主。聚类分析挖掘药物组合4条，新处方7首。去除使药甘草进一步进行关联规则和聚类分析最终得出17种对药、角药组合，4种常用的聚类组合，1个核心处方，包括党参、当归、菟丝子、女贞子、旱莲草、白术、桑寄生、茯苓、刘寄奴、黄芪、黄精、熟地黄12味中药。 研究二：通过网络药理学获得核心处方的有效成分73个，靶点254个，交集靶点138个，核心处方与多囊卵巢综合征的相关化合物19个，包括槲皮素、木犀草素、山萘酚、7-甲氧基-2-甲基异黄酮、豆甾醇、β-谷甾醇等。应用PPI网络和Cytoscape软件进行拓扑分析和聚类分析后筛选出12个核心靶点，包括MAPK1、TP53、CASP3、RB1、MAPK14、EGFR、MRC、EGR、ESR1、AKT1、FOS、STAT1，聚类1以MAPK1、为种子基因的7个蛋白组成，聚类2以EGR为种子基因的5个蛋白组成，GO分析显示核心靶点涉及药物反应、基因表达的正调控、细胞凋亡的负调控、细胞外液、高分子复合物、酶结合、相同的蛋白质结合等。KEGG富集分析显示核心靶点的主要信号通路包括PI3K-AKT信号通路、AGE-RAGE信号通路、P53信号通路等。 结论 1.孙冰教授对于多囊卵巢综合征的治疗临床疗效确切，可有效改善患者临床症状，促进卵泡发育，调节性激素水平。孙冰教授对于多囊卵巢综合征卵泡期的治疗是在八 珍二至汤的基础上加减化裁而成，全方以补肾益阴、益气和血为大法，兼以理气化痰、活血化瘀。用药以补虚药为主，理气活血药为辅，寓消于补，气血兼顾，肾肝脾三脏同调以盛天癸,充任脉，调畅气血。 2.推测核心处方治疗多囊卵巢综合征是分子间协同作用的结果，具有多成分、多靶点、多途径的特点。为进一步实验研究提供理论依据，为临床推广一种安全、经济、有效的治疗方法提供科学支撑。
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