摘要
近年来,随着当前社会人口老龄化的不断加剧,帕金森病(Parkinson’sdisease,PD)已经成为全球性的健康问题之一。目前,左旋多巴类制剂被认为是治疗帕金森病的传统药物,但长期服用这类药物治疗可能会对患者的机体健康造成很多的副作用。因此,寻找新的更加安全的天然物质代替左旋多巴类制剂是目前治疗帕金森病的新兴的热点。人参多糖是一种从人参中提取的生物活性成分,也是一种药食同源的益生元,并有临床研究表明人参多糖可能有助于改善帕金森病患者的运动功能和生活质量。益生菌具有调节机体内的肠道菌群平衡,抑制病原菌的生长等作用,并有研究表明益生菌联合益生元在改善帕金森疾病的研究中也有很多相关报道。同时,人参多糖联合益生菌的作用不仅易于被人体消化吸收,还可以更好的发挥人参多糖的药用价值。 故本文基于在人参多糖对帕金森病影响研究的基础上,以AB系野生型斑马鱼为实验动物,拟通过人参多糖和乳酸菌的联合作用干预鱼藤酮给药建立的PD斑马鱼模型,探讨其对PD斑马鱼运动功能、大脑氧化应激水平和肠道炎症因子表达水平,以及利用16SrRNA技术,探讨其对PD斑马鱼肠道菌群各方面的影响,并在此基础上,开发一款人参多糖酸奶,通过单因素以及正交实验对酸奶感官评价和质构结果进行测定,进行加工工艺的优化。主要研究内容如下: (1)研究了人参多糖和乳酸菌的联合作用对帕金森斑马鱼运动功能的影响,通过旷场实验、集群测试实验和镜面咬合测试实验,结果发现,与对照组相比,PD模型组斑马鱼运动功能显著下降(P<0.05);人参多糖益生菌联合干预的改善效果与PD模型组相比具有显著性(P<0.05),同时比人参多糖或者益生菌单独干预效果要更显著,但没有统计学意义(P>0.05)。 (2)研究了人参多糖和乳酸菌的联合作用对帕金森斑马鱼大脑氧化应激水平的影响,通过评估丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力,结果发现,MDA含量相比对照组,PD模型组的MDA含量水平显著升高(P<0.05),而益生菌组的MDA含量水平相比于PD模型组显著下降(P<0.05)。SOD水平相比对照组,PD模型组的SOD活力水平显著降低,而人参多糖益生菌组相比于PD模型组显著上升(P<0.05)。 (3)研究了人参多糖和乳酸菌的联合作用对PD斑马鱼肠道炎症因子表达的影响,通过qPCR实验,结果发现,与对照组相比,帕金森模型组中Lyz、TNF-α、IL-1β、NF-κB的mRNA表达量显著上调(P<0.05),而人参多糖组和人参多糖益生菌组的炎症因子表达相比PD模型组显著上调(P<0.05),说明人参多糖和益生菌联合作用更有利于改善肠道炎症。 (4)研究了人参多糖益生菌对帕金森斑马鱼肠道菌群的影响。基于16SrRNA高通量测序技术对肠道菌群进行分析发现,人参多糖益生菌使帕金森斑马鱼菌群结构发生了较大变化,并没有恢复到原本的菌群结构。与对照组相比,PD模型组的Thermobispora、Shewanella、Lactobacillus_apis、Lactobacillus_mellis的丰度显著下降(P<0.05)。而Akkermansia的丰度有所提高,人参多糖益生菌组相比于PD模型组,Cetobacterium、FirmicutesbacteriumZOR0006、Plesiomonas、Hyphomicrobium等类群的丰度显著降低(P<0.05),而Streptosporangium、Thermobispora、Pseudaeromonas、Aeromonas、Lactobacillus_intestinalis的丰度显著增高(P<0.05)。 (5)研究了人参多糖对酸奶各项工艺指标的影响,通过单因素试验及正交实验优化人参多糖酸奶的制作工艺,以酸奶的pH值变化、酸度、持水力、质构、乳酸菌活菌菌落数的影响,并结合感官评定为指标,研究了发酵时间、发酵剂添加量和人参多糖添加量对酸奶的品质的影响,以确定最佳工艺。结果表明酸奶的最佳配方为:发酵温度9h,发酵剂接种量为0.12%,人参多糖的添加量为0.20%。