摘要
西藏高原受海拔与气候的影响,生态环境极其脆弱,生态系统一旦被破坏,很难恢复如初。严酷的高原环境孕育出了独特而丰富的生物资源,其中裂腹鱼亚科鱼类的染色体表现出数目多样性和倍性多态性的特征。近些年来由于过度捕捞、栖息地破坏、外来物种入侵等因素,西藏地区鱼类资源出现大幅度下降。其中色林错裸鲤作为青藏高原最大的湖泊色林错湖中唯一的经济鱼类,同时是中国西藏的特有物种,其种群发展状况需要高度关注,但是关于色林错裸鲤的细胞遗传学方面研究尚未见报道。 本研究以色林错裸鲤肾脏组织细胞为材料,采用常规冷滴片法制备染色体标本,通过吉姆萨染色,银染显带技术(Ag-NORs)、CMA3/DAPI双重荧光染色技术及荧光原位杂交技术(FISH),确定其染色体数目、核型、带型,并推测其倍性。同时,为探究其多倍化类型、确定染色体同源性,以其精巢组织为材料,通过石蜡切片法判断鱼体性腺发育时期,并采用常规冷滴片法制备染色体标本,观察第一次减数分裂前期Ⅰ的染色体行为,分析其染色体联会情况,进而判断其染色体同源性。 (1)对色林错裸鲤染色体数目和核型进行研究,实验结果表明:色林错裸鲤染色体数目为4n=88,核型公式为40m+20sm+28st/t,NF=148。(2)对色林错裸鲤带型及倍性进行分析,通过Ag-NORs染色观察,色林错裸鲤间期核最高银染点数为4个,有丝分裂中期染色体分裂相银染点数最高为4个,且信号点两强两弱,位于第二组亚中部着丝粒染色体(SM2)短臂上,为端部Ag-NORs;色林错裸鲤肾细胞染色体经CMA3/DAPI双重荧光染色,有丝分裂中期分裂相显示有4个CMA3阳性部位,且信号点两强两弱,位于第二组亚中部着丝粒染色体(SM2)短臂的端部区域;色林错裸鲤肾细胞染色体经荧光原位杂交染色观察,有丝分裂中期分裂相显示有4个FISH阳性部位,位于亚中部着丝粒染色体(SM2)短臂的端部区域。(3)为探究色林错裸鲤精巢细胞减数分裂行为,通过形态学和石蜡切片法观察,色林错裸鲤处于Ⅳ期精巢;生殖细胞的MI终变期的染色体由二价体和四价体构成,共9种类型,染色体数目符合(8~16)Ⅳ+(12~28)Ⅱ=88。 因此,色林错裸鲤是4n=88,且含有4套染色体组的遗传四倍体,与既往报道裂腹鱼亚科为多倍体观点一致。对色林错裸鲤的核型分析能够观察到具有3对明显较大的中部着丝粒染色体,与其他裂腹鱼亚科鱼类相同。色林错裸鲤的进化地位在裂腹鱼亚科鱼类中属于高度特化的类群。在色林错裸鲤精巢细胞中可观察到存在二价体和四价体的存在,说明色林错裸鲤是同源四倍体,且正处于二倍化进化的过程中。本研究补充了色林错裸鲤细胞遗传学方面研究的空白,为物种间亲缘关系的研究提供重要依据,为后续开展裂腹鱼亚科鱼类分类和进化地位相关研究提供参考。