摘要
Poly(A)结合蛋白相互作用蛋白1(Paip1)是一种PABP结合蛋白，以1∶1的比例与PABP结合。PAIP1与PABP及翻译起始因子(EIFs)的相互作用诱导了mRNA的循环化来刺激翻译启动。PAIP1在体内和体外都与YBX2相互作用,体外实验证实这种相互作用可以重新激活精子发生中YBX2所抑制的mRNA翻译。但是Paip1在体内是否参与精子发生过程中的翻译控制仍然未知，因此本论文利用Paip1在生殖细胞中特异性缺失的条件敲除雄鼠模型进行研究，详细阐述了PAIP1在雄性生殖系统中的功能，及初步探究了其作用机制。实验结果如下: (1）WB与IHC结果显示，PAIP1蛋白在睾丸中优势表达，且主要富集于睾丸曲细精管内的精母细胞中。免疫荧光检测敲除效率结果显示，实现了Paip1在生殖细胞中的特异性敲除;(2)生殖力鉴定与早期胚胎发育实验结果显示，WT组雄鼠可以正常产生后代，CKO组雄性小鼠与野生型雌鼠交配无法产生后代，且雄鼠精子没有受精能力;(3)H&E染色与TUNEL染色结果显示，与WT组相比，CKO组小鼠睾丸曲细精管中生精细胞呈现异常发育状态，出现生殖细胞大量丢失的现象;(4)WB、IF、IHC与RT-qPCR结果显示与WT组相比，CKO组精原细胞有丝分裂，精母细胞减数分裂进程和精子变形过程存在损伤;(5)精子计数与精子顶体与线粒体活染结果显示,CKO组精子数量显著少于WT组,且精子头部的顶体形态出现异常;(6)RT-qPCR结果显示，CKO组组蛋白-过渡蛋白-鱼精蛋白的替换过程存在阻滞，染色质浓缩受到影响。(7)IHC与WB结果显示，YBX2在Paip1缺失后含量与WT组相比并未发生改变，在WT组中，YBX2定位于圆形精细胞的胞质中，但是在CKO组中出现在细胞核内，定位发生改变。 综上所述，本研究发现Paip1在生殖细胞中特异性缺失导致雄性小鼠不育,并出现少精弱精的情况，精子变形过程出现异常，还发现了PAIP1的互作蛋白YBX2表达模式发生变化。本研究的发现旨在为Paip1在生殖系统中的功能进行简要阐述，并对Paip1影响精子发生的作用机制做出初步探究。
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