摘要
平菇（Pleurotus ostreatus (Fr.) Kummer）是我国栽培规模最大的食用菌之一，近年来，黄斑病在我国平菇主产区出现了不同程度的爆发，爆发区域平菇的质量和产量都受到了严重的影响，本研究以采集的平菇黄斑病子实体为研究对象，运用稀释涂布法和科赫法则分离病原菌，并采用16S rDNA、gyrB和recA对病原菌进行分子鉴定，结合生理生化指标鉴定病原菌；之后，运用转录组学对平菇黄斑病的侵染机制进行研究，并采用qRT-PCR对部分差异表达基因进行了验证；在此基础上对平菇黄斑病进行了生物防治研究。为进一步研究病原菌感染过程和平菇黄斑病及其他食用菌病害的生物防治研究提供有价值的信息。主要研究结果如下： 1. 通过革兰氏染色和扫描电镜观察到病原菌是革兰氏阳性、杆状。经16S rDNA、gyrB和recA测序构建系统发育树，平菇黄斑病病原菌菌株HB-1与Bacillus velezensis和B. amyloliquefaciens在同一分支上。经生理生化指标测定，确定平菇黄斑病病原菌为解淀粉芽孢杆菌B. amyloliquefaciens。 2. 采用高通量RNA测序（RNA-seq）技术，研究了病原菌侵染平菇相关基因的转录表达水平。与健康平菇子实体组织相比，病原菌侵染后组织中共有486个（295个上调，186个下调）基因被鉴定为差异表达基因。选取20个基因（10个上调，10个下调）进行qRT-PCR验证，其中有14个差异表达基因与转录组测序结果一致，5个差异表达基因与转录组测序结果不一致，1个差异表达基因与转录组测序结果相反。差异分析结果显示：66个上调的差异表达基因和42个下调的差异表达基因分别与63个和39个特定的KEGG通路相关，其中参与氨基酸代谢、碳水化合物和能量代谢和信号转导途径的差异表达基因响应病原菌侵染平菇子实体机制，即与平菇黄斑病病原菌侵染机制有关。 3. 测量与分析了不同物质乙醇提取液对已分离到的平菇黄斑病病原菌和患病子实体进行抑菌试验观察。在抑菌试验中，醋糟乙醇提取液和葡萄酒渣乙醇提取液对平菇黄斑病病原菌的抑制作用好，其中浓度为0.06 g/mL的醋糟乙醇提取液效果最佳。之后，对醋酸杆菌BA15进行发酵，试验结果显示：30℃条件下160 r/min振荡培养7 d时的醋酸杆菌BA15发酵液对平菇黄斑病病原菌菌株HB-1在平板和子实体具有显著的抑制作用。
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