摘要
背景与目的： 脑脊液循环动力学机制相关研究表明，心脏及血管搏动、呼吸运动、体位姿势、纤毛运动、骨骼肌等因素影响着脑脊液的循环。近年来，有学者提出“肌硬膜桥复合体可能是脑脊液循环动力来源之一”的全新学说。肌硬膜桥复合体存在于枕下区，包括头后小直肌、头后大直肌、头下斜肌、项韧带、椎硬膜韧带以及这些结构发出的肌硬膜桥纤维。肌硬膜桥纤维的主要构成为I型胶原纤维，具有高抗延展性及抗张力的生物学特点。本课题组指出，头部运动时，枕下肌收缩产生的作用力，会通过肌硬膜桥纤维传递并牵拉硬脊膜，改变蛛网膜下腔的容积，产生负压，从而促进脑脊液的循环。研究显示脑脊液压力升高或者降低均会造成头痛的发生。此外，既往大量研究表明肌硬膜桥复合体的病理性改变可能与慢性头痛的发病机制有关。所以，我们推测肌硬膜桥复合体的病理性改变、异常的脑脊液循环、慢性头痛三者之间可能存在一定的因果关系，但是其机制尚不明确。 博来霉素对于胶原纤维，尤其是I型胶原纤维具有显著的增生作用，是比较成熟的制造胶原纤维增生动物模型的试剂。常常用于建造肺纤维化或硬皮病的动物模型。本研究以成年SD大鼠为实验对象，注射博来霉素溶液制作大鼠肌硬膜桥纤维增生性模型，观察博来霉素诱导肌硬膜桥复合体增生的形态学变化，以及引发的大鼠行为学改变及头痛因子在脑内某些核团的表达情况。本研究为肌硬膜桥复合体的功能学研究提供基础，进一步明确肌硬膜桥复合体的病理性变化可诱发头痛，并初步揭示其相关调节机制。 材料与方法： 选用39只三月龄的雄性SD大鼠并随机分为三组：博来霉素实验组（BLM组）、药物对照组（PBS组）和空白对照组（CTL组），每组13只。 第一部分：药物注射四周之后，对各组大鼠颈部进行取材、石蜡包埋及切片。通过Masson染色及半定量分析观察各组大鼠寰枕间隙肌硬膜桥复合体等组织的形态学变化；通过检测各组大鼠的脑脊液分泌速率判断是否影响脑脊液的循环。 第二部分：药物注射五周之后，通过对大鼠颈部组织切片进行Masson染色及半定量分析，验证肌硬膜桥复合体增生性模型建立成功；脑组织切片进行免疫组织化学染色，观察并分析CGRP和5-HT在脑内疼痛相关核团的变化情况；观察各组大鼠挠头、爬笼、理毛等行为，采用行为学评分的方式比较其差异。 结果： 第一部分：（1）上颈部Masson染色结果：与其他两组相比，BLM组的大鼠头背侧小直肌腹侧发出的肌硬膜桥纤维更加致密，间接或直接与硬脊膜连接的肌硬膜桥纤维明显增多。此外，BLM组头背侧小直肌肌肉纤维排列更加紧密。（2）脑脊液分泌速率结果：BLM组脑脊液分泌速率明显大于PBS和CTL组，且具有统计学意义。 第二部分：（1）上颈部Masson染色及半定量分析结果：BLM组的大鼠寰枕后间隙的肌硬膜桥纤维与寰枕后膜的胶原纤维含量均显著增加，提示肌硬膜桥复合体增生性模型建立成功。（2）行为学观察结果：BLM组大鼠的头痛相关行为学评分明显高于PBS组和CTL组；BLM组大鼠的头痛相关行为学评分在药物注射前后也有明显差异。（3）脑组织免疫组织化学染色结果：与PBS和CTL组相比，CGRP在BLM组的丘脑腹后内侧核、杏仁核、臂旁核和三叉神经脊束核内表达水平增加；而5-HT在BLM组的前扣带回皮质、杏仁核和中缝背核中的含量增加。 结论： 本研究证明博来霉素对大鼠寰枕间隙肌硬膜桥复合体具有显著增生作用。肌硬膜桥复合体的增生性改变可引起脑脊液循环的异常以及大鼠慢性头痛的发生。这种疼痛可能是通过头面部疼痛传导途径上行，且伴有焦虑、抑郁等情绪障碍。本研究进一步为“肌硬膜桥复合体是脑脊液循环动力来源之一”的学说提供支持，也为一些慢性原发性头痛的发病机制提供了新思路。
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