摘要
背景：胆囊胆固醇息肉及胆固醇结石是肝胆外科常见病。目前有关胆囊胆固醇息肉及胆固醇结石的形成机制存在诸多理论，但从微生物学角度切入的研究尚存在较大探索空间，且此两种疾病对人民群众的健康造成较大的影响，对医生的临床诊疗带来一定程度的挑战，鉴于第二代高通量测序技术的进步，本研究拟对上述疾病患者的胆道、肠道菌群进行展示。 目的：本研究拟基于高通量测序技术对胆囊胆固醇息肉、胆固醇结石患者的胆道（胆囊、胆道）、肠道菌群的构成进行展示，通过对患者胆道、肠道菌群构成以及差异性菌门、菌属的对比来探索胆道、肠道菌群与胆囊胆固醇息肉、胆固醇结石的相关性。 方法：选取于陕西省核工业二一五医院2021年7月至2022年7月普通外科住院行胆囊切除术，且术后病理证实为胆囊胆固醇结石、胆固醇息肉患者共22人，其中胆囊胆固醇结石组12人，获取到胆囊胆汁12例，胆道胆汁样本6例，粪便3例；胆囊胆固醇息肉组10人，获取到胆囊胆汁样本10例，胆道胆汁样本6例，粪便样本3例。所有研究对象均符合纳排标准。统一对样本进行DNA提取、16SrRNAV3+V4区扩增，最后利用IlluminaHiseq2500测序平台进行高通量测序、构建文库和生物信息分析。 结果： 1.本研究共测得2166610个高质量tags、其中胆固醇结石组样本共测得1110863个tags，胆固醇息肉组样本共测得1055747个tags。以97%序列相似性为基准，与公开数据库相比对后，胆固醇结石组鉴定出1927个OTUs、胆固醇息肉组鉴定出780个OTUs（包含样本间重复）。 2.在α多样性分析时，胆囊胆固醇结石及胆固醇息肉组内胆道、肠道菌群对比中；两组粪便样本对比、胆囊胆汁样本对比中，其α多样性具有统计学差异。 3.在β多样性分析时，胆囊胆固醇息肉、胆固醇结石组内胆道、肠道菌群对比中；胆囊胆汁样本对比中，其β多样性具有统计学差异。 4.在胆囊胆固醇结石及胆固醇息肉组内胆道、肠道菌群对比中；胆囊胆汁样本对比中，可在门、属水平鉴定出差异性物种。 结论：本研究首次使用IlluminaHiSeq平台同时对胆囊胆固醇结石和胆固醇息肉患者的胆道、肠道菌群进行了高通量测序，并展示了其胆道、肠道菌群的多样性和组成结构。在α多样性、β多样性、优势菌的门、属水平差异性物种鉴定中发现不同程度的差异，其反应的物种多样性及丰富度差异，优势菌门、菌属差异可能为两种疾病的微生物学发病机制不同之处。
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