摘要
圆盘菌科真菌是一类蜡质、半透明且颜色较鲜亮的小型盘菌,可营腐生、捕食和寄生生活,生长于枯枝、腐木、枯叶、树皮或动物粪便表面等生境,其部分无性型可通过形成捕食器官来捕食线虫,在真菌系统学和分类学研究上具有重要的意义。 广西属于亚热带季风气候,雨量充沛,而陕西气候差异较大,由北向南依次为温带、暖温带和北亚热带,两省区气候差异较大,本研究对桂陕两省区的圆盘菌科真菌分类进行比较研究,并选取分离自两地的2种捕食线虫真菌进行线虫诱导前后差异代谢物分析,主要研究结果如下: 1.在广西和陕西两省区进行圆盘菌科真菌资源调查,采集标本共计330份,采用形态学和分子系统学方法,鉴定出晶圆盘菌属18种,圆盘菌属32种,其中疑似新种4个,已发表新种4个,即百色圆盘菌、汉中圆盘菌、南宁圆盘菌和松树圆盘菌,中国新记录种9个,即螺旋孢晶圆盘菌、金黄圆盘菌、齿缘圆盘菌、金合欢圆盘菌、多泡圆盘菌、多肉圆盘菌、蹄形圆盘菌、酒红圆盘菌和扇蟹圆盘菌。 2.通过子囊孢子弹射法分离获得无性型菌株56株,鉴定后分别属于隔指孢属、亚隔指孢属、钳霉属、小掘氏孢属和三叉孢属5个属,其中,亚隔指孢属和小掘氏孢属为捕食线虫真菌,可产生捕食器官粘球或收缩环,并建立了12对有性型-无性型对应关系,其中4对为首次报道。 3.选择具有捕食线虫作用的椭孢亚隔指孢和云南小掘氏孢进行代谢产物研究,在阴、阳离子模式下分别检测出化合物1228种和1408种,其中2种模式共同检测到的化合物有485种。椭孢亚隔指孢差异显著的化合物共52种,其中下调的化合物35种,上调的化合物17种;而云南小掘氏孢差异显著的化合物共144种,其中下调的化合物71种,上调的化合物73种。 4.椭孢亚隔指孢显著差异代谢产物富集到的代谢通路有abc转运蛋白、代谢途径、嘌呤代谢、次级代谢产物的生物合成和甘油酯新陈代谢等。而云南小掘氏孢显著差异代谢产物富集到的代谢通路有萜类化合物和类固醇的生物合成、植物激素的生物合成、嘧啶代谢和植物次级代谢产物的生物合成等。 5.通过GC-MS发现两种捕食线虫真菌在线虫诱导条件下均可产生噻二唑,无菌水为溶剂时,10mg/mL浓度的噻二唑对线虫有极显著的驱避效果,而0.01mg/mL浓度的噻二唑对线虫有吸引作用。甲醇为溶剂时,只有10mg/mL和1mg/mL浓度的噻二唑对线虫有驱避效果,0.1mg/mL和0.01mg/mL浓度的噻二唑对线虫有吸引作用。乙醇为溶剂时,1mg/mL和0.1mg/mL浓度的噻二唑对线虫有驱避效果。N,N-二甲基甲酰胺为溶剂时,100mg/mL和10mg/mL浓度的噻二唑对线虫有驱避效果。 综上所述可知,广西和陕西由于其地理环境,如气候、温度、经纬度等的差异,导致两省区圆盘菌科真菌的物种差异较大。同时,对分离自两省的2种捕食线虫真菌在有无线虫诱导条件下产生的代谢产物差异进行了初步研究,结果表明捕食线虫真菌在有无线虫诱导条件下所产生的代谢产物差异大,呈现明显的分组;同时也说明同一捕食线虫真菌在不同的生活条件下或不同捕食线虫真菌在相同的生活条件下所产生的差异代谢产物的种类和数量均不同。并且,发现高浓度噻二唑对线虫具有驱避作用,而低浓度噻二唑对线虫具有吸引作用,为线虫的生物防治提供理论基础。