摘要
背景： 资料报道孕期补充维生素D（vitaminD，VD）能有效预防产后抑郁症（postpartumdepression，PPD）的发生，但其具体作用机制不明。目前认为抑郁症的主要原因是中枢神经系统特定部位的5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）、去甲肾上腺素、多巴胺等神经递质的水平过低及/或其受体功能低下。色氨酸是神经递质5-HT的唯一前体，色氨酸通过血脑屏障是中枢神经系统特定部位合成5-HT的必要前提。血脑屏障通透机制包括被动扩散、主动转运和外排转运等。LAT1是L型氨基酸转运体（L-typeaminotransporters）的亚型，在大脑、乳腺、子宫、卵巢等少数组织细胞膜上均有高表达，负责中性氨基酸的转运。所以，我们推测LAT1是调节色氨酸通过血脑屏障以合成中枢神经系统特定部位5-HT的重要靶点。有研究表明，生殖激素水平的变化有助于PPD的发生，怀孕期间雌激素水平升高，而产后急剧下降。产后血清雌二醇水平降低，其血液中5-HT水平也低，而VD则可以升高育龄妇女血清雌激素水平。许多研究发现性激素可以影响5-HT的合成、再摄取和降解，但至今尚不知性激素能否通过调节LAT1的表达影响5-HT在中枢神经系统的合成。维生素B6（vitaminB6,VB6）进入人体内后，主要以5’-磷酸吡哆醛的辅酶形式参与很多的酶反应，是参与5-HT、多巴胺、肾上腺素、去甲肾上腺素和γ-氨基丁酸合成途径中的辅助因子。有研究表明，维生素B6可辅助抗抑郁药物治疗抑郁症。基于5’-磷酸吡哆醇在神经递质合成中的积极作用，VB6可能在预防和治疗抑郁症方面发挥有益作用。 目的： 1.通过临床病例调查研究VD和VB6水平对PPD的影响 2.研究VD和雌激素对LAT1蛋白表达的影响。 3.研究调节LAT1表达能否影响5-HT水平。 方法： 1.使用神经生长因子（NGF）诱导嗜铬细胞瘤细胞（PC12）分化，构建神经细胞模型。 2.采用WesternBlot技术，检测PC12细胞中LAT1的蛋白水平，研究VD和雌激素对LAT1蛋白表达的影响。 3.采用Elisa方法，检测PC12细胞上清中5-HT的浓度，研究调节LAT1表达能否影响5-HT水平。 4.选取2022年06月—2023年03月在修水县妇幼保健院建立孕产妇保健个人健康档案并住院分娩的正常孕产期妇女，孕28周应用《汉密尔顿抑郁量表》（HAMD）来评测孕妇抑郁情况，产后6周应用《爱丁堡产后抑郁量表》（EPDS）来评测产妇抑郁情况，共纳入226例研究对象，随机分组，双盲对照。进行HAMD评分和EPDS评分时检测血清VD和VB6水平，以评估VD和VB6对PPD的影响。 结果： 1.VD3可显著上调LAT1的表达。与未添加VD3组相比，在PC12细胞培养液中添加了VD3后，其浓度为10nM和50nM的实验组LAT1表达水平是未添加组的1.14倍[95%可信度（95%Cl）：0.67-1.61]和1.17倍（95%Cl：0.79-1.54），LAT1表达水平无明显变化（P＞0.05）；添加了浓度为100nM的实验组LAT1表达水平为未添加组的1.44倍（95%Cl：1.27-1.62）,差异显著(P＜0.01)；添加了浓度为250nM和500nM的实验组LAT1表达水平分别为未添加组的2.12倍（95%Cl：1.72-2.51）和1.88倍（95%Cl：1.60-2.15），差异显著(P＜0.001)。 2.β-雌二醇可显著上调LAT1的表达。与Control组（经过含碳吸附胎牛血清预处理但未添加β-雌二醇相比，添加了β-雌二醇（10-10M、10-9M、10-8M）后，LAT1表达水平分别为Control组的1.79倍（95%Cl：1.16-2.43）、2.19倍（95%Cl：2.01-2.34）和2.18倍（95%Cl：1.95-2.22），差异显著（P＜0.001）。 3.β-雌二醇可显著提高5-HT水平。与Control组（经过含碳吸附胎牛血清预处理但未添加β-雌二醇）相比，添加了浓度为10-9M和10-8Mβ-雌二醇后，5-HT水平显著提高，差异显著（P＜0.05），而添加了10-10Mβ-雌二醇组5-HT水平变化不明显，结果无统计学意义（P＞0.05）。 4.提高VD水平可以降低抑郁评分。产前HAMD评分，与VD水平呈低度负相关(r=-0.3347，P＜0.001），但与VB6水平无明显相关(r=-0.1148，P＞0.05）。产后EPDS评分，与VD水平呈低度负相关(r=-0.3248，P＜0.001），但与VB6水平也无显著相关(r=-0.1314，P＞0.05）。 5.产前补充VD可以预防PPD的发生，但联合使用VB6效果提升不明显。产前使用安慰剂组PPD的发病率为22.41%，使用VB6组PPD的发病率为20%，使用VD组PPD的发病率为8.62%，联合使用VD+VB6组PPD的发病率为5.45%。与安慰剂组相比，补充VD+VB6组PPD发病率显著降低（P＜0.01），补充VD组PPD发病率显著降低（P＜0.05），且均具有统计学意义。VB6组PPD发病率降低，但无统计学意义（P＞0.05）。 6.与安慰剂组相比，产前使用了VD和联合使用VD+VB6的患者EPDS评分更低，差异显著（P＜0.01）；与单独使用VD组相比，联合使用VD+VB6的患者EPDS评分更低，差异显著（P＜0.05）。但单独使用VB6组与安慰剂组相比，EPDS评分无统计学差异（P＞0.05）。 结论： 1.VD3和雌二醇均可以上调LAT1的表达。 2.雌二醇可上调5-HT的表达。 3.产前HAMD评分和产后EPDS评分与VD水平呈低度负相关。 4.产前使用VD和VD+VB对降低产后抑郁评分有积极作用，产前补充VD可以预防PPD的发生，但产前VD联合使用VB6在预防PPD时协同效果不明显。
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