摘要
实验目的： 1. 使用电灼仪灼伤小鼠皮肤，并用金黄色葡萄球菌感染创面，建立小鼠创伤愈合及增生性瘢痕模型。 2. 探究西红花苷Ⅰ与海螵蛸这两种药物单独及联合使用对伤口愈合的治疗作用以及瘢痕的产生情况，为临床治疗创伤愈合和预防瘢痕形成提供实验依据。 实验方法： 1. 利用电灼伤联合细菌感染构建更稳定的小鼠创面愈合及瘢痕模型，通过计算伤口愈合率、进行HE染色、Masson染色、免疫组化染色及ELISA检测，评估该模型创面皮肤组织病理学改变。 2. 使用西红花苷Ⅰ、海螵蛸、西红花苷Ⅰ+海螵蛸对电灼伤联合细菌感染小鼠创面进行治疗，通过计算伤口愈合率、进行HE、Masson及免疫组化染色评估治疗效果。 实验结果： 第一部分：1. 创面愈合率：模型（Model）组伤口愈合所用时间更长，各时相创面愈合率均低于对照（Control）组。2. 创面组织病理结果：HE染色结果显示，Model组伤口愈合进展缓慢，第7天时Model组未见皮肤组织，而Control组痂皮与肌层中间出现少量结缔组织；第14天时，与Control组相比，Model组未见完整表皮层和真皮层，第21天两组均有完整表皮层形成。3. Masson染色及胶原容积分数（CVF）分析：Control组和Model组在创面愈合后均出现不同程度的胶原堆积。随着创面修复的持续进展，Model组CVF后期明显高于Control组。4. 免疫组织化学染色及平均光密度分析：创面愈合的整个过程中，Model组IL-6、TGF-β1、α-SMA和COLⅢ表达均高于Control组；Model组TGF-β3在第7天时表达显著低于Control组，且随伤口愈合进程表达升高；在创伤修复的后期，Model组的COLⅠA1表达显著高于Control组。5. ELISA法检测静脉血中IL-6浓度：Model组静脉血中IL-6含量高于Control组。 第二部分：1. 创面愈合率：治疗组各时相创面愈合率均高于Model组，伤口愈合更快。2. 创面组织病理结果：HE染色结果显示，各治疗组创面愈合进展更快，第7天皮肤结构完整性优于Model组；第14天表皮层、真皮层明显变薄。3. Masson染色及胶原容积分数（CVF）分析：第7天，西红花苷Ⅰ（CROⅠ）治疗组与西红花苷Ⅰ+海螵蛸（CROⅠ+CB）联合治疗组CVF高于Model组；第14天各组CVF均增大，但各治疗组均低于Model组，直至第28天。4. 免疫组织化学染色及平均光密度分析显示：CROⅠ组创面IL-6表达各时相均低于Model组，CROⅠ+CB组随时间推移逐渐低于Model组；整体来看，在创伤修复的整个过程中各治疗组创面组织TGF-β1的表达均低于Model组；与Model组相比，第7天CB组创面TGF-β3的分泌显著降低，第21天CROⅠ组TGF-β3的表达显著升高；治疗组COLⅢ在创伤愈合的整个过程均低于Model组，α-SMA、COLⅠA1仅在中后期较低。 实验结论： 1. 对小鼠皮肤创面人工接种金黄色葡萄球菌后，炎性反应增强，皮肤结构完整性差，形成了与人类病理性瘢痕类似的瘢痕结构。2. 西红花苷Ⅰ和海螵蛸均可促进金葡菌感染的小鼠创面愈合，减轻病理性瘢痕的产生。
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