摘要
目的:枯草期牧草营养价值不高，该时期绵羊长期处于营养不佳的状态。本实验通过探讨枯草期和青草期绵羊不同组织脂肪分解代谢的差异，为今后深入研究枯草期绵羊的脂肪代谢提供理论依据，更为进一步提高羊肉质量和养殖效益提供实践参考。 方法:本研究分别以枯草期和青草期内蒙古达茂旗牧区的苏尼特绵羊作为研究对象，采集绵羊的脂肪组织（皮下脂肪、尾脂、肾周脂肪）、肌肉组织（肱三头肌、肱二头肌、背腰最长肌）和肝脏进行研究。运用实时荧光定量PCR方法检测参与甘油三酯合成（DGAT2、LPL）、甘油三酯水解（ATGL、ABHD5、PLIN2）、脂肪酸氧化（ACADL、CPT-1B）和cAMP-PKA信号通路（GNAS、PRKACA、CREB）的基因表达量。用Western blotting检测ATGL蛋白在不同组织的表达情况，并用ELISA方法检测脂肪分解过程中相应蛋白（cAMP、PKA、ACAC、BHBA、OA）的含量。 结果:1. 甘油三酯合成相关基因试验结果显示，除了尾脂的DGAT2基因是枯草期显著高于青草期，其余组织试验结果皆为枯草期显著低于青草期。LPL基因的表达量在脂肪组织中表现为枯草期显著低于青草期，但在肌肉组织和肝脏中没有显著性。 2. 与甘油三酯水解相关试验结果表明，皮下脂肪、肱三头肌和肱二头肌的ATGL基因在枯草期的表达量显著高于青草期，尾脂与肝脏中的基因表达量为枯草期显著低于青草期。ABHD5 基因的表达量在所检测的组织中均没有显著性。除肾周脂肪和肝脏的PLIN2 基因没有显著性外，其余组织均呈现出枯草期的表达量显著高于青草期的结果。随后用Western Blotting的方法对ATGL蛋白进行检测，发现ATGL只在绵羊的肱三头肌和肱二头肌中枯草期的表达量显著高于青草期。 3. 对cAMP-PKA信号通路上的GNAS、PRKACA、CREB基因进行检测。结果显示为枯草期绵羊的GNAS基因表达量在脂肪组织中显著高于青草期，而在肝脏中则显著低于青草期，在肌肉组织中没有显著性。PRKACA基因结果在脂肪组织和肱二头肌中枯草期的表达量显著高于青草期，其余组织均没有显著性。CREB基因在脂肪组织和肱二头肌中枯草期的表达量显著低于青草期，而在肱三头肌中枯草期的表达量显著高于青草期。随后用ELISA方法对cAMP-PKA信号通路上的腺苷酸环化酶（cAMP）和蛋白激酶A （PKA）进行含量测定。试验结果呈现出，cAMP在所有组织中均呈现出枯草期的含量显著高于青草期的趋势，PKA的含量除肾周组织没有显著性以外，其余所检测的组织都表现为枯草期含量显著高于青草期。 4. 脂肪酸氧化的试验结果为枯草期绵羊的ACADL基因在皮下脂肪和背腰最长肌中的表达量显著高于青草期。CPT-1B 基因在皮下脂肪和背腰最长肌中枯草期的表达量显著高于青草期。然后用ELISA方法对脂肪酸氧化过程中的中间产物进行检测，发现乙酰乙酸（ACAC）、β-羟丁酸（BHBA）和草酸（OA）的表达量只在皮下脂肪中呈现出枯草期含量显著高于青草期的结果，而在背腰最长肌和肝脏组织中没有显著性。 结论:1.枯草期和青草期绵羊不同组织中脂肪合成和分解代谢关键基因和蛋白存在不同程度差异。与青草期相比，枯草期绵羊甘油三酯水解和脂肪酸氧化显著增多。2.cAMP-PKA信号通路通过调节ATGL基因介导枯草期绵羊甘油三酯的水解过程，其中GNAS、PRKACA可能会起主要调节作用。
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