摘要
胆汁酸具有乳化和提高机体免疫力的作用，胆固醇是凡纳滨对虾的必需营养物质。在低鱼粉对虾饲料的配制中，胆固醇和胆汁酸是需要考虑的两种功能性物质。本论文以凡纳滨对虾为实验对象，研究在低鱼粉、零鱼粉饲料中添加胆汁酸和胆固醇对凡纳滨对虾生长性能、营养物质利用、总胆汁酸含量、肝胰腺组织学和抗氧化能力的影响。研究结果可以为胆汁酸、胆固醇在对虾饲料中的合理应用和低鱼粉对虾饲料的配制提供依据。 试验一：在低鱼粉饲料中添加胆汁酸对凡纳滨对虾生长、营养物质利用的影响 本实验研究在低鱼粉饲料中添加胆汁酸对凡纳滨对虾生长性能、营养物质消化能力及血清生化指标的影响。首先，设置鱼粉含量为200g/kg的正对照组（FM20）和鱼粉含量为140g/kg的负对照组（FM14），在负对照饲料基础上分别添加胆汁酸75（BA75），150（BA150）和300（BA300）mg/kg。共5组等氮等脂的饲料，饲喂平均初体重为1.09±0.01g的凡纳滨对虾56d。结果显示，各组成活率无显著差异，（均高于90%）。与FM20组相比，FM14组增重率降低12.9%，饲料系数升高0.17，全虾粗蛋白含量、干物质及蛋白质表观消化率、肝胰腺和血清胆汁酸含量显著降低（P＜0.05）；在负对照饲料（FM14组）中添加胆汁酸后，有提高对虾增重率，全虾粗蛋白含量，干物质及蛋白质表观消化率的趋势（P＞0.05），并达到和FM20组基本一致的水平（P＞0.05），其中，BA150组的饲料系数较FM14组降低0.16（P＜0.05）。与FM14组相比，在饲料中添加胆汁酸75-300mg/kg显著降低血清谷丙转氨酶活性，增加碱性磷酸酶活性（P＜0.05）；此外，添加300mg/kg胆汁酸，显著降低了血清谷草转氨酶活性，提高了肝胰腺蛋白酶活性和血清总胆汁酸含量（P＜0.05）。综上，在低鱼粉饲料（含鱼粉140g/kg）中添加150mg/kg胆汁酸能够提高凡纳滨对虾生长性能和营养物质利用。 试验二：低鱼粉饲料中添加胆汁酸和胆固醇对凡纳滨对虾生长、营养物质利用和肝胰腺健康的影响 试验一研究发现在低鱼粉饲料中添加胆汁酸可以改善对虾生长性能，但差异不显著，饲料中添加胆固醇和胆汁酸是否能达到与正对照组一致的水平呢？本实验研究在低鱼粉饲料中单独或联合添加胆固醇、胆汁酸对凡纳滨对虾生长性能、肝胰腺消化酶活性、血清生化指标和抗氧化指标的影响。设置鱼粉含量为200g/kg的正对照组（FM20）和鱼粉含量为100g/kg的负对照组（FM10），在负对照饲料基础上分别添加胆固醇560mg/kg，胆汁酸150mg/kg，胆固醇560mg/kg+胆汁酸150mg/kg，共5组饲料，饲喂初体重平均为1.00±0.01g的凡纳滨对虾56d。结果显示：与FM20组相比，FM10组增重率、蛋白酶和脂肪酶活性、血清溶菌酶活性、肝胰腺和血淋巴总胆汁酸含量显著降低，饲料系数、谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性、丙二醛含量显著升高（P＜0.05），部分肝小体星状结构消失，B细胞和R细胞数量减少。在负对照饲料（FM10组）中分别添加胆固醇和胆汁酸，有提高对虾增重率，淀粉酶活性与肝胰腺和血清总胆汁酸含量的趋势（P＞0.05）。联合添加胆固醇和胆汁酸显著提高了对虾增重率和肝胰腺脂肪酶和蛋白酶活性，降低了饲料系数（P＜0.05）。与FM10组相比，饲料中添加胆固醇和胆汁酸后，肝小体恢复正常，星状结构清晰。综上，在低鱼粉饲料（含鱼粉100g/kg）中添加胆固醇和胆汁酸能够提高凡纳滨对虾生长性能和消化能力，保护肝胰腺健康，联合添加胆汁酸和胆固醇表现出一定的协同作用。 试验三：零鱼粉饲料中添加胆汁酸和胆固醇对凡纳滨对虾生长、营养物质利用和肝胰腺健康的影响 本实验研究在零鱼粉饲料中添加胆固醇和胆汁酸对凡纳滨对虾生长、肝胰腺消化酶活及血清生化指标，肝胰腺和血淋巴总胆汁酸、胆汁酸合成与转运相关基因表达的影响。设置鱼粉含量为200g/kg的正对照组（FM20）和鱼粉含量为0g/kg的负对照组（FM0），在负对照饲料基础上分别添加胆固醇1120mg/kg，胆汁酸150、300mg/kg，胆固醇1120mg/kg+胆汁酸150mg/kg，胆固醇1120mg/kg+胆汁酸300mg/kg，共7组饲料，饲喂初体重平均为1.00±0.01g的凡纳滨对虾56d。结果显示：与FM20组相比，FM0组增重率、消化酶活性、免疫性能、肝胰腺和血淋巴总胆汁酸含量，胆汁酸合成酶以及胆汁酸转运蛋白基因相对表达量显著降低，饲料系数、谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性、丙二醛含量显著升高（P＜0.05），肝小体萎缩，排列不紧密，大量B细胞和R细胞消失。在负对照饲料（FM0组）中分别添加胆固醇和胆汁酸后，有提高对虾增重率，消化酶活性与肝胰腺和血清总胆汁酸含量，胆汁酸合成与转运基因表达量的趋势，肝胰腺部分组织结构恢复完整，B细胞和R细胞数量增加。在零鱼粉饲料中联合添加胆固醇和胆汁酸后，显著增加肝胰腺和血清总胆汁酸含量、胆固醇7α羟化酶的活性、酸性磷酸酶，降低丙二醛的含量，增加肝胰腺超氧化物歧化酶活性活性（P＜0.05）。综上，在零鱼粉饲料中添加胆固醇和胆汁酸显著增加肝胰腺和血清总胆汁酸含量，有改善凡纳滨对虾生长性能的趋势，联合添加胆汁酸和胆固醇未表现出显著的协同作用。
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