摘要
目的：本研究利用转染Sox9脂肪干细胞联合壳聚糖、羟基磷灰石、氧化石墨烯支架，探究复合细胞-支架复合物对软骨缺损的修复效果。 方法：①按适当比例制备复合支架。②新西兰大白兔麻醉成功后，无菌分离腹股沟区脂肪组织进行培养，流式细胞鉴定表面抗原。③取3代ADSCs转染Sox9培养后进行WesternBlot检测；④将转染Sox9基因ADSCs接种于（CS/nHAp/GO）复合支架上培养，行MTT检测细胞活性。⑤新西兰大白兔18只，体重2.0～2.5kg，制作软骨缺损动物模型，随机A、B、C三组：A组单纯复合支架组、B组转染Sox9脂肪干细胞联合支架组及C组空白对照组（仅为缺损，不做任何干预），于8周后处死动物，进行大体观察评估，WesternBlot法观察Ⅱ型胶原表达情况，软骨Wakitani评分软骨修复效果。 结果：①成功制备支架，支架内部孔径大小均匀，比表面积丰富。②流式细胞仪检测提示符合实验动物的抗原表达。③WesternBlot检测ADSCs基因转染效果。④MTT检测转染Sox9的脂肪干细胞联合支架ADSCs细胞活性。⑤动物模型统计学分析结果显示：三组间Ⅱ型胶原蛋白相对灰度值相比较具有统计学差异（F=184.769，P＜0.05），三组间软骨缺损组织学Wakitaniscore组间差异显著（F=9.454，P＜0.01）。 结论：CS-nHAp-GO复合支架具有良好孔径以及表面积，有利于细胞的粘附以及提供良好的生长微环境。Sox9能促进细胞向软骨细胞分化，而转染Sox9的ADSCs复合CS-nHAp-GO支架可明显促进兔膝关节软骨的再生修复。
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