摘要
禽源大肠杆菌引起的大肠杆菌病是制约禽业养殖发展最为常见的细菌性疾病，LPS作为大肠杆菌细胞壁的重要组成部分，被广泛用于诱导组织损伤模型的建立。前期本课题组建立了野山杏总黄酮提取及纯化方法，通过动物实验发现野山杏总黄酮具有抗急性炎症和镇痛作用。本文以1日龄三黄鸡为试验动物，以LPS为肺炎模型建立的诱导剂，通过组织学观察、ELISA、RT-PCR和WB等方法考察野山杏总黄酮对LPS诱导雏鸡肺炎的影响，从而探讨野山杏总黄酮对雏鸡肺炎的抗炎机制，为将新疆丰富的野山杏资源用于缓解或治疗禽类炎症相关疾病提供参考。研究结果如下： （1）将不同剂量LPS（2.5 mg·kg-1、5.0 mg·kg-1、10.0 mg·kg-1）腹腔注射雏鸡建立肺脏炎症模型，通过体温检测、湿干比测定、炎症因子含量、活性以及表达水平的检测分析肺炎模型建立情况。结果表明，各剂量组经LPS诱导均出现明显的炎症临床症状且均伴有发热现象；通过组织学观察发现LPS各剂量组肺泡结构被破坏，肺泡壁增厚，肺小叶间隙缩小， LPS剂量越大肺泡结构破坏越严重，肺泡中有大量血细胞浸润，肺小叶间隙炎症严重变窄甚至消失；与空白组相比，LPS各剂量组肺脏湿干（W/D）比值、炎症因子TNF-α的含量和mRNA表达水平以及COX-2活性均出现极显著升高（P＜0.01），该影响呈剂量依赖性，当LPS剂量为5.0 mg·kg-1时炎症因子TNF-α的含量和COX-2活性较2.5 mg·kg-1 LPS剂量组有着极显著升高（P＜0.01），其他指标差异不显著（P＞0.05）；以LPS 5.0 mg·kg-1制备肺炎模型为宜。 （2）腹腔注射5.0 mg·kg-1 LPS建立雏鸡肺炎模型，通过体温检测、湿干比测定、炎症因子含量、活性检测、NF-κB信号通路相关因子mRNA以及蛋白表达水平检测分析野山杏总黄酮各剂量组（50、100、200 mg·kg-1）对LPS诱导肺炎的影响并对野山杏总黄酮的抗炎机制进行研究。结果表明，野山杏总黄酮各剂量组能够改善LPS诱导雏鸡肺炎所致水肿，降低炎症导致的机体发热，可修复肺炎导致的病理变化，能抑制TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2的分泌以及COX-2的活性，可促进IL-10分泌和SOD活性升高；野山杏总黄酮可通过抑制NF-κB信号通路中NF-κB mRNA水平、蛋白水平的表达以及COX-2蛋白的活化，降低炎症因子TNF-α、IL-1βmRNA表达。 综上所述，腹腔注射5.0 mg·kg-1 LPS可制备雏鸡肺炎模型，各剂量野山杏总黄酮对LPS诱导的肺炎有抑制作用，野山杏总黄酮对LPS诱导肺炎的抗炎机制与抑制NF-κB/COX-2信号通路有关。
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